Enzymatische Aktivitätsmessung der Polynukleotid 5'-Hydroxylkinase mittels spektrophotometrischer Assays

Die außergewöhnliche Leistung bei der Enzymaktivitätstestung unterscheidet Creative Enzymes von anderen Anbietern. Unsere Testplattformen umfassen alle Arten von Hauptanalytikgeräten. Unser professioneller Ruf in der Aktivitätstestung stammt von einem Team spezialisierter Enzymologen. Als Experten bieten wir Aktivitätstests für Transferasen an, wie z.B. 5’-Polynukleotid-Hydroxylkinase.

Polynukleotid 5'-Hydroxylkinase (PNK) ist in Viren und zellulären Organismen zu finden. Die am weitesten verbreitete Funktion von PNK ist ihre Fähigkeit, die Übertragung der γ-Phosphatgruppe eines Nukleosidtriphosphats auf das 5’-Hydroxyl eines Polynukleotids zu katalysieren. Das Vorhandensein von Mg²⁺ ist für die Kinaseaktivität von PNK unerlässlich.

Polynukleotid 5'-Hydroxylkinase (PNK) spielt eine entscheidende Rolle aufgrund der unverzichtbaren Funktion in verschiedenen DNA-Reparaturprozessen. In menschlichen Zellen führt die RNAi-Downregulation von PNK zu einer deutlichen Sensibilisierung für spontane Mutationen sowie für verschiedene genotoxische Agenzien. Studien haben gezeigt, dass Mutationen im PNK-Phosphatasedomäne mit der entwicklungsbedingten neurologischen Störung assoziiert sind. Klinische Manifestationen sind Mikrozephalie und refraktäre Epilepsie. Daher wird dieses Enzym als eng mit der menschlichen neurologischen Entwicklung verbunden identifiziert. Als DNA-Reparaturprotein hat PNK großes klinisches Interesse geweckt. Durch die Hemmung der Aktivität dieses Proteins kann die Empfindlichkeit von Tumorzellen gegenüber Strahlentherapie und Chemotherapie verbessert werden, was eine neue Strategie für die Krebsbehandlung bietet. Angesichts des enormen Potenzials in der klinischen Forschung werden immer mehr Studien zu diesem Enzym durchgeführt. Aktivitätsforschungen, die auf standortspezifischen Mutationen basieren, sind die Hauptansätze zur Lokalisierung der aktiven Stellen des Enzyms. Daher muss die Aktivitätsmessung präzise und zuverlässig sein. Zu diesem Zweck bietet Creative Enzymes geeignete Aktivitätstests an, die Störungen durch andere Enzyme oder Zusatzstoffe minimieren können.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Polynukleotid 5'-Hydroxylkinase von der Maus.
Referenz: Garces F et al. Mol Cell. 2011 44(3): 385-396.

Creative Enzymes ist eines der wenigen Unternehmen, die präzise Aktivitätstests für Polynukleotid 5'-Hydroxylkinase anbieten. Im Gegensatz zu Kinase-Aktivitätstestkits ist unsere Methode gezielter und reproduzierbarer. Die Messung wird garantiert innerhalb einer begrenzten Zeit mit zuverlässigen Ergebnissen abgeschlossen. In Zukunft wird Creative Enzymes Ihr vertrauenswürdiger Partner bleiben.