Messung der Enzymaktivität der Polynukleotid-5'-Hydroxyl-Kinase mittels spektrophotometrischer Assays

Die herausragende Leistungsfähigkeit in der Enzymaktivitätsprüfung hebt Creative Enzymes von anderen Anbietern ab. Unsere Assay-Plattformen umfassen sämtliche wesentlichen analytischen Hauptinstrumente. Unser professioneller Ruf in der Aktivitätsprüfung beruht auf einem Team spezialisierter Enzymologen. Als Experten bieten wir Aktivitätsassays für Transferasen an, wie z. B. die 5’-Polynukleotid-Hydroxyl-Kinase.

Die Polynukleotid-5'-Hydroxyl-Kinase (PNK) kommt in Viren und zellulären Organismen vor. Die am häufigsten genutzte Funktion von PNK ist ihre Fähigkeit, die Übertragung des γ-Phosphats eines Nukleosidtriphosphats auf die 5’-Hydroxylgruppe eines Polynukleotids zu katalysieren. Das Vorhandensein von Mg²⁺ ist für die Kinaseaktivität von PNK essenziell.

Die Polynukleotid-5'-Hydroxyl-Kinase (PNK) spielt aufgrund ihrer unverzichtbaren Funktion in verschiedenen DNA-Reparaturprozessen eine zentrale Rolle. In humanen Zellen führt ein RNAi-Knockdown von PNK zu einer ausgeprägten Sensibilisierung gegenüber spontanen Mutationen sowie gegenüber unterschiedlichen genotoxischen Agenzien. Studien haben gezeigt, dass Mutationen in der PNK-Phosphatase-Domäne mit einer neurologischen Entwicklungsstörung assoziiert sind. Klinische Manifestationen sind Mikrozephalie und therapieresistente Epilepsie. Daher gilt dieses Enzym als eng mit der neurologischen Entwicklung des Menschen verbunden. Als DNA-Reparaturprotein hat PNK erhebliche klinische Aufmerksamkeit erlangt. Durch die Inhibition der Aktivität dieses Proteins kann die Sensitivität von Tumorzellen gegenüber Strahlentherapie und Chemotherapie erhöht werden, wodurch sich ein neuer Ansatz für die Krebsbehandlung ergibt. Angesichts des großen Potenzials in der klinischen Forschung wird dieses Enzym in einer wachsenden Zahl von Studien untersucht. Aktivitätsstudien auf Basis ortsgerichteter Mutationen sind die wichtigsten Ansätze zur Lokalisierung der aktiven Zentren des Enzyms. Daher muss die Aktivitätsmessung präzise und zuverlässig sein. Zu diesem Zweck bietet Creative Enzymes geeignete Aktivitätsassays an, die Interferenzen durch andere Enzyme oder Zusatzstoffe minimieren können.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Polynukleotid-5'-Hydroxyl-Kinase aus der Maus.
Referenz: Garces F et al. Mol Cell. 2011 44(3): 385-396.

Creative Enzymes ist eines der wenigen Unternehmen, das präzise Aktivitätsassays für die Polynukleotid-5'-Hydroxyl-Kinase anbietet. Im Unterschied zu Kinase-Aktivitätsassay-Kits ist unsere Methode zielgerichteter und besser reproduzierbar. Die Messung wird innerhalb eines definierten Zeitfensters mit belastbaren Ergebnissen garantiert abgeschlossen. Auch künftig bleibt Creative Enzymes Ihr vertrauenswürdiger Partner.