Enzymaktivitätsmessung für Ketol-Säure Reduktase-Isomerase (NADP+)

Creative Enzymes ist stolz darauf, die Messung der Enzymaktivität für verschiedene Enzyme, insbesondere für Ketol-Säure-Reduktorisomerase (NADP⁺), anzubieten. Unsere Forschungsexperten haben sich stets der Bereitstellung exzellenter Dienstleistungen und genauer Ergebnisse für unsere Kunden gewidmet.

Ketol-Säure-Reduktorisomerase (NADP⁺) (EC 1.1.1.86; KARI), die in vielen Bakterien und Archaeen vorkommt, ist ein Mitglied der Familie der Oxidoreduktasen, und der systematische Name dieser Enzymklasse ist (R)-2,3-Dihydroxy-3-methylbutanoat:NADP+ Oxidoreduktase (isomerisierend). Das Enzym kann auch als bezeichnet werden:

• Dihydroxyisovaleriansäure-Dehydrogenase (isomerisierend);
• Acetohydroxy-Säure-Isomeroreduktase;
• Ketol-Säure-Reduktorisomerase;
• Alpha-Keto-Beta-Hydroxylacyl-Reduktorisomerase;
• 2-Hydroxy-3-Keto-Säure-Reduktorisomerase;
• Acetohydroxy-Säure-Reduktorisomerase;
• Acetolactat-Reduktorisomerase;
• Dihydroxyisovaleriansäure (isomerisierend) Dehydrogenase;
• Isomeroreduktase;
• Reduktorisomerase;
• Ketol-Säure-Reduktorisomerase.

Ketol-Säure-Reduktorisomerase (NADP⁺) ist ein bi-funktionales Enzym, das zwei ziemlich unterschiedliche, aber aufeinanderfolgende Reaktionen an einem gemeinsamen aktiven Zentrum katalysiert und sowohl als Isomerase als auch als Reduktase wirkt. In der Isomerisierungsreaktion wird 2-Hydroxy-2-methyl-3-ketobutyrat (auch bekannt als 2-Acetolactat) umgeordnet, um 3-Hydroxy-3-methyl-2-ketobutyrat zu produzieren, wobei eine Mg²⁺-abhängige Methylmigration verwendet wird. In der Reduktionsreaktion unterliegt diese 2-Ketosäure einer M²⁺-abhängigen (Mg²⁺, Mn²⁺ oder Co²⁺) Reduktion unter Verwendung von NADPH, um 2,3-Dihydroxy-3-methylbutyrat zu erzeugen, das der Vorläufer von Valin und Leucin ist. Isoleucin, eine dritte verzweigtkettige Aminosäure (BCAA), wird in einem Weg produziert, der dem von Valin parallel verläuft, wobei die gleiche Reihe von Enzymen verwendet wird, wobei die Ketol-Säure-Reduktorisomerase (NADP⁺) die Umwandlung zwischen 2-Hydroxy-2-ethyl-3-ketobutyrat und 2,3-Dihydroxy-3-ethylbutyrat katalysiert. Es ist zu beachten, dass alle Mitglieder der Enzymfamilie der Ketol-Säure-Reduktorisomerase eine Präferenz für Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid-Phosphat-Hydrid (NADPH) gegenüber Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid-Hydrid (NADH) als Cofaktor gezeigt haben. Der BCAA-Weg kann in vielen Organismen gefunden werden, außer bei Säugetieren. Aufgrund dieser Besonderheit erhält die mikrobielle Produktion von verzweigtkettigen Aminosäuren für Tierfutter oder menschliche Nahrungsergänzungsmittel zunehmend Aufmerksamkeit wegen wirtschaftlicher Werte. Darüber hinaus kann der BACC-Weg auch so konstruiert werden, dass Isobutanol produziert wird, das eine potenzielle Quelle für erneuerbare Chemikalien und Brennstoffe ist.

Es kann zusammengefasst werden, dass Ketol-Säure-Reduktorisomerase (NADP⁺) ein wichtiges Enzym in der chemischen Industrie ist. Die Aktivitätsassays der Ketol-Säure-Reduktorisomerase (NADP⁺) unter Verwendung von Spektrophotometrie sind jedoch im industriellen Maßstab nicht gut etabliert, obwohl der spektrophotometrische Assay als die zuverlässigste und kosteneffektivste Methode zur Quantifizierung der Aktivität gilt. Glücklicherweise konnte Creative Enzymes den Aktivitätsassay von höchster Qualität entwickeln. Wir sind bestrebt, der zuverlässigste Dienstleister für Enzymaktivitätsassays auf dem globalen Markt zu sein. Unser schneller Service, gute Kundenbetreuung und engagierte Ansätze haben uns zu einem bevorzugten Anbieter gegenüber unseren Mitbewerbern gemacht.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Ketol-Säure-Reduktorisomerase von Slackia exigua im Komplex mit NADP⁺.
PDB: 4KQW