Messung der Enzymaktivität der L-Iditol-2-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes bietet zuverlässige Aktivitätsmessungen der L-Iditol-2-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays an. Die Verlässlichkeit der Prüfergebnisse wird durch unsere erfahrenen Wissenschaftler sowie modernste analytische Instrumentierung sichergestellt. Wir sind ein führender Anbieter für Aktivitätsassays der L-Iditol-2-Dehydrogenase und bieten eine Vielzahl an Substratoptionen – sowohl für reine L-Iditol-2-Dehydrogenase als auch für Enzyme in Mischproben.

L-Iditol-2-Dehydrogenase (EC 1.1.1.14) ist ein Mitglied der Protein-Familie der mittelketten Dehydrogenasen/Reduktasen. Sie wird als Oxidoreduktase klassifiziert und gehört zu den Enzymen, die auf die CH-OH-Gruppe des Elektronendonors wirken, wobei spezifisch NAD+ (Nicotinamidadenindinukleotid) – jedoch nicht NADP+ (Nicotinamidadenindinukleotidphosphat) – als Elektronenakzeptor dient. In der Enzymologie katalysiert die L-Iditol-2-Dehydrogenase die Umsetzung von L-Iditol und NAD+ zu L-Sorbose, NADH und H+. Der systematische Name dieser Enzymklasse lautet L-Iditol:NAD+ 2-Oxidoreduktase. Das Enzym ist außerdem unter folgenden Bezeichnungen bekannt:

• Polyol-Dehydrogenase;
• Sorbitol-Dehydrogenase;
• L-Iditol:NAD+ 5-Oxidoreduktase;
• L-Iditol-(Sorbitol)-Dehydrogenase;
• Glucitol-Dehydrogenase;
• L-Iditol:NAD+ Oxidoreduktase;
• NAD+-abhängige Sorbitol-Dehydrogenase;
• NAD+-Sorbitol-Dehydrogenase.

Dieses Enzym wird nahezu ubiquitär in allen tierischen Geweben exprimiert und ist zudem weit verbreitet in Pflanzen, Archaeen, Bakterien und Hefen. Beim Säugetier zählen Leber und Samenblase zu den Geweben, in denen dieses Enzym besonders häufig genutzt wird. Hervorzuheben ist, dass dieses Enzym – als Sorbitol-Dehydrogenase bezeichnet – am Fruktose- und Mannosemetabolismus sowie an der Zuckerakkumulation beteiligt ist. Als zytosolisches Enzym wandelt die Sorbitol-Dehydrogenase im Kohlenhydratstoffwechsel Sorbitol, die Zuckeralkoholform von Glukose, in Fruktose um. Zusammen mit der Aldosereduktase kann sie Glukose ohne ATP-Verbrauch in Fruktose überführen; hierfür ist jedoch NAD+ erforderlich, u. a. im Zusammenhang mit einem konservierten Zink-Bindungsmotiv und einer hydrophoben Substratbindetasche. Insgesamt ist dieses Enzym aufgrund seiner Beteiligung an der Entstehung diabetischer Komplikationen von wesentlicher Bedeutung; seine Tertiärstruktur kann daher die Entwicklung von Arzneimitteln zur Behandlung von Menschen mit Diabetes unterstützen.

Die Substratspezifität der L-Iditol-2-Dehydrogenase ist sehr vielseitig, da sie auf eine große Anzahl von Zuckeralkoholen wirkt, einschließlich, aber nicht beschränkt auf L-Iditol, D-Glucitol, D-Xylitol und D-Galactitol. Allerdings kann ihre enzymatische Aktivität sowohl durch Schwermetallionen wie Quecksilber als auch durch Thiolverbindungen wie L-Cystein stark gehemmt werden. Dadurch wird die Aktivitätsbestimmung des Enzyms unter biologischen Bedingungen zu einer Herausforderung. Creative Enzymes ist in der Lage, die enzymatische Aktivität der L-Iditol-2-Dehydrogenase mittels kontinuierlicher spektrophotometrischer Geschwindigkeitsbestimmung zu quantifizieren und dabei Interferenzen durch Schwermetalle und Cystein zu vermeiden.

Creative Enzymes unterstützt seit vielen Jahren die pharmazeutische sowie die Ernährungsindustrie bei der Quantifizierung der enzymatischen Aktivität der L-Iditol-2-Dehydrogenase. Ihre spezifischen Anforderungen können anspruchsvolle Aktivitätsmessungen oder routinemäßige Aktivitäts-Screenings umfassen. In jedem Fall sind wir Ihre erste Wahl für die zuverlässigsten Dienstleistungen.

Abbildung: Struktur der Sorbitol-Dehydrogenase des Menschen als biologisches Haupttetramer im Komplex mit vier NAD-Molekülen (grün) und vier Zinkionen (blau).
Referenz: Pauly TA. et. al., Structure. 2003, 11(9), 1071-1085.