Messung der Enzymaktivität der Mannitol-1-phosphat-5-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes gehört zu den wenigen Unternehmen weltweit, die Aktivitätsmessungen der Mannitol-1-phosphat-5-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays anbieten. Wir sind darauf spezialisiert, Aktivitätsassays zu entwickeln, um den bislang ungedeckten Bedarf in der Enzymdetektion und -charakterisierung zu erfüllen. Creative Enzymes ist in der Lage, mit einer ausgereiften Methode hochpräzise und reproduzierbare spektrophotometrische Assays für Mannitol-1-phosphat-5-Dehydrogenase durchzuführen.

Mannitol-1-phosphat-5-Dehydrogenase (EC 1.1.1.17) ist das Enzym, das aus D-Mannitol-1-phosphat (M1P) und Nicotinamidadenindinukleotid (NAD+) D-Fructose-6-phosphat (F6P) bildet. Es gehört zur Familie der Oxidoreduktasen, insbesondere zu den Enzymen, die auf die CH-OH-Gruppe des Donors wirken und NAD+ bzw. NADP+ (Nicotinamidadenindinukleotidphosphat) als Elektronenakzeptor verwenden. Dieses Enzym weist eine ausgeprägt hohe Substratspezifität gegenüber F6P und M1P für die jeweiligen reduktiven bzw. oxidativen Reaktionen auf. Es wurde als Sulfhydryl-Typ-Enzym identifiziert, da seine Aktivität durch N-Ethylmaleimid und p-Hydroxymercuribenzoat gehemmt wird und die Hemmung durch 2-Mercaptoethanol aufgehoben werden kann. Die wichtigste Funktion dieses Enzyms besteht darin, als Schlüsselenzym die Mannitol-Biosynthese zu regulieren und am Fructose- und Mannose-Stoffwechsel beteiligt zu sein. Die systematische Bezeichnung dieser Enzymklasse lautet D-Mannitol-1-phosphat:NAD+ 2-Oxidoreduktase; es ist jedoch auch unter weiteren Namen bekannt:

• Hexose-Reduktase;
• Mannitol-1-phosphat-Dehydrogenase;
• D-Mannitol-1-phosphat-Dehydrogenase;
• Fructose-6-phosphat-Reduktase.

Spektrophotometrische Assays werden häufig zur Quantifizierung der enzymatischen Aktivität der Mannitol-1-phosphat-5-Dehydrogenase eingesetzt, da die Reduktion von NAD+ zu NADH während der Oxidation von Alkoholen bequem bei 340 nm detektiert werden kann. Obwohl bereits 1972 (Ikawa et al.) eine spektrophotometrische Assay-Methode beschrieben wurde, hat Creative Enzymes Modifikationen vorgenommen, um die Methode zu modernisieren und an die hohen Anforderungen der Kunden anzupassen. Die F6P-reduzierende Aktivität wird durch Monitoring des Abbaus von NADH bei 340 nm bestimmt; die Reaktion wird durch Zugabe von F6P gestartet. Die M1P-oxidierende Aktivität wird durch Monitoring der NADH-Bildung bestimmt und durch Zugabe von M1P initiiert.

Insgesamt ist Creative Enzymes Ihr verlässlicher Partner für spektrophotometrische Assays der Mannitol-1-phosphat-5-Dehydrogenase. Wir zählen zu den führenden Anbietern im Bereich enzymatischer Assays für Mannitol-1-phosphat-5-Dehydrogenase. Die Verlässlichkeit der Testergebnisse basiert auf unseren modernsten spektrophotometrischen Instrumenten sowie einem starken Team von Enzymologen.