Enzymaktivitätsmessung für ungesättigte Rhamnogalacturonyl-Hydrolase

Creative Enzymes ist ein führendes Unternehmen im Bereich hochwertiger bioanalytischer Dienstleistungen. Wir bieten personalisierte Auftragsforschung, die sich auf die Messung der Enzymaktivität spezialisiert hat, wie z.B. den spektrophotometrischen Aktivitätstest für ungesättigte Rhamnogalakturonylhydrolase. Aufgrund der kürzlichen Entdeckung und Identifizierung dieses Enzyms wurde wenig Forschung betrieben, um sein kinetisches Verhalten und seine Struktur zu untersuchen. Die ordnungsgemäße Messung seiner Aktivität ist ohne die oben genannten Informationen noch schwieriger. Dennoch verlässt sich Creative Enzymes auf sein eigenes hervorragendes Expertenteam und hat robuste Aktivitätsanalysen entwickelt, um die Anforderungen der Kunden zu erfüllen.

Die ungesättigte Rhamnogalakturonylhydrolase (EC 3.2.1.172, YesR) wurde kürzlich aus Bacillus subtilis identifiziert und gemäß ihren Enzymeigenschaften in eine neue Familie der Glykosid-Hydrolasen 105 (GH-105) eingeteilt. YesR wirkt spezifisch auf ungesättigtes Rhamnogalakturonan (RG) und erzeugt ΔGalA aus dem Substrat. Es wird vermutet, dass das Enzym in Bakterien und Pilzen konserviert ist. Seine 3-dimensionale Struktur bleibt unklar.

Rhamnogalakturonan (RG) ähnelt dem verzweigten Bereich von Pektin, dem komplexesten Polysaccharid, das die Pflanzenzellwand bildet. Pflanzenzellwände spielen eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung der Zellform, dem Transport von Nährstoffen, dem Export von Toxinen und Metaboliten sowie dem Schutz vor mikrobiellen Pathogenen. Enzyme, die die Pflanzenzellwand abbauen, sind entscheidend für das Eindringen mikrobieller Pathogene in Pflanzenzellen. Viele pflanzenpathogene Bakterien produzieren Enzyme, die für den Abbau von RG-I, der Hauptkette des Rhamnogalakturonans, verantwortlich sind. Das Enterobacterium Erwinia chrysanthemi, das ein typisches Mitglied der Pflanzenpathogene ist, verursacht weichen Fäulniskrankheiten und produziert verschiedene Arten von RG-I-verwandten Enzymen, einschließlich ungesättigter Rhamnogalakturonylhydrolase. Aufgrund seiner einzigartigen Aktivität hat die ungesättigte Rhamnogalakturonylhydrolase großes Potenzial in der Lebensmittelverarbeitung, der Nutzung von Biomasse und landwirtschaftlichen Anwendungen als Katalysator oder potenzielles Ziel zur Bekämpfung von Pflanzenpathogenen. Daher wird der zukünftige Markt für das Enzym schnell wachsen. Allerdings wurde der Standard-Aktivitätstest für dieses Enzym noch nicht etabliert.

Abbildung 1: Vorgeschlagenes katalytisches Reaktionsmechanismus von YteR.
Referenz: Itoh T, Ochiai A, Mikami B, et al. Biochemical and biophysical research communications, 2006, 347(4): 1021-1029.

Creative Enzymes ist stolz darauf, den präzisen enzymatischen Aktivitätstest für ungesättigte Rhamnogalakturonylhydrolase anzubieten. Die Enzymaktivität wird durch die Überwachung des Abfalls der Absorbanz bei 235 nm gemessen; dies entspricht dem Verlust der C=C-Doppelbindung des Substrats. Unsere Testergebnisse werden von Tausenden von Kunden, die seit vielen Jahren unsere Dienstleistungen in Anspruch nehmen, am meisten vertraut. Mit einer langen Geschichte in Forschung und Entwicklung hat Creative Enzymes umfangreiche Erfahrungen gesammelt und ist zur ersten Wahl in der Messung der Enzymaktivität geworden.

Abbildung 2: Die Kristallstruktur des YteR-Proteins aus Bacillus subtilis.
PDB: 1NC5