Messung der Enzymaktivität der 3‑Hydroxybutyrat‑Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes ist auf die Messung von Enzymaktivitäten spezialisiert. Durch die Prüfung der Aktivitäten verschiedener Oxidoreduktasen in den vergangenen Jahren hat Creative Enzymes umfassende und fundierte Expertise aufgebaut und kann schnelle sowie qualitativ hochwertige Enzymaktivitäts-Assay-Services anbieten, einschließlich 3‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase.

Die 3‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase gehört zur SDR‑Familie (Short-Chain Dehydrogenases/Reductases). Dieses Enzym katalysiert die Umwandlung von (R)-3‑Hydroxybutanoat zu Acetoacetat unter Verwendung von NAD+ als Kofaktor. Darüber hinaus oxidiert das Enzym weitere 3‑Hydroxymonocarbonsäuren. Das Enzym ist auch unter folgenden Alternativbezeichnungen bekannt:

• NAD‑β‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase
• Hydroxybutyrat-Oxidoreduktase
• β‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase
• D‑β‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase
• D‑3‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase
• D‑(−)‑3‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase
• β‑Hydroxybuttersäure-Dehydrogenase
• 3‑D‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase
• β‑Hydroxybuttersäure-Dehydrogenase

3‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase wurde in Mitochondrien der Rattenleber nachgewiesen und aus menschlichem Herzgewebe, Rinderherz sowie Rattenleber gereinigt. Sie kommt zudem in zahlreichen Mikroorganismen vor. Für ihre Aktivität besteht eine spezifische Anforderung an Phosphatidylcholin. Im Gegensatz dazu benötigen bakterielle Enzyme keine Phospholipide für ihre Aktivität. Dieses Enzym ist an der Synthese und dem Abbau von Ketonkörpern sowie am Butanoat-Stoffwechsel beteiligt. Daher wurde das aus Rhodobacter sp.7 gewonnene Enzym für die diagnostische Analyse von Ketonkörpern bei Diabetes mellitus eingesetzt, was das erhebliche Potenzial des Enzyms als zentrales Diagnostikreagenz unterstreicht.

Die Struktur dieses Enzyms wird als Homotetramer beschrieben. DL‑2‑Hydroxybutyrat und DL‑Laktat sind wirksame Inhibitoren; auch Natriumcacodylat hemmt die Enzymaktivität stark. Creative Enzymes kann auch komplexe Fragestellungen in Ihrem Forschungsprojekt abdecken und präzise sowie verlässliche Ergebnisse der Aktivitätsbestimmung liefern. Da 3‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase zudem einige β‑Hydroxysäuren katalysieren kann, darunter L‑3‑Hydroxybutyrat, L‑Threonin, D‑Threonin, L‑Serin, D‑Serin und DL‑Glycerat als Substrate, bietet Creative Enzymes entsprechend den Anforderungen des Kunden auch gerichtete bzw. quantitative Tests zur Substratspezifität an.

Abbildung: Kristallstruktur der D‑3‑Hydroxybutyrat-Dehydrogenase aus Pseudomonas fragi im Komplex mit NAD+.
Referenz: Ito K et al. J Mol Biol. 2006 27;355(4):722-33

Creative Enzymes ist seit vielen Jahren in der Branche der Enzymaktivitätsmessung tätig. Umfassende und professionelle Erfahrung hat uns bei Kunden und Forschenden einen ausgezeichneten Ruf eingebracht. Auch künftig wird Creative Enzymes Sie mit spezialisierten Services dabei unterstützen, Ihre Ziele zu erreichen und substanzielle Ergebnisse zu erzielen.