Enzymaktivitätsmessung von Alpha, Alpha-Phosphotrehalase

Als zuverlässiger Anbieter bietet Creative Enzymes hervorragende und kosteneffektive Dienstleistungen mit Wettbewerbsvorteilen gegenüber anderen Unternehmen. Zu den Höhepunkten unserer Dienstleistungen gehören innovative Testmethoden, schnelle Durchlaufzeiten, umfangreiche Erfahrungen und spezialisierte Analysen. Als biotechnologisches Unternehmen kann Creative Enzymes Enzymaktivitätsassays zur Unterstützung verschiedener Forschungsbereiche bereitstellen. Hier bieten wir die Aktivitätsbestimmung für Alpha, Alpha-Phosphotrehalase an.

Alpha, Alpha-Phosphotrehalase (EC 3.2.1.93) wird durch treA kodiert und gehört zur GH13-Familie. Dieses Enzym katalysiert die Spaltung der alpha, alpha-1,1-glycosidischen Bindung von Trehalose-6-phosphat, um Glukose und Glukose-6-phosphat zu produzieren. Die freie Glukose wird weiter phosphoryliert zu dem zweiten Molekül Glukose-6-phosphat, und beide Glukose-6-phosphat-Moleküle treten später in die Glykolyse ein, wodurch Energie für das Zellwachstum und die Proliferation erzeugt wird. Dieses Enzym ist der Schlüssel zur Nutzung von Trehalose als einzige Kohlenstoffquelle. Trehalose ist ein nicht-reduzierendes Disaccharid, das in einer Vielzahl von lebenden Organismen vorkommt. Mit Ausnahme von Wirbeltieren ist der Zucker in nahezu allen anderen Organismen verbreitet, einschließlich Bakterien, Pilzen, Protozoen und Pflanzen, wo er als Energiespeicher oder für die Synthese von Zellkomponenten dienen kann. Darüber hinaus hat sich gezeigt, dass Trehalose Proteine und Zellmembranen vor Inaktivierung oder Denaturierung durch Austrocknung, Dehydration, Hitze, Kälte und Oxidation schützt. Zudem wird Trehalose in Zellen zusammen mit dem Phosphotransferasesystem (PTS) transportiert und fungiert als Energiequelle. Bis jetzt wurde nur die Kristallstruktur der Alpha, Alpha-Phosphotrehalase von Bacillus licheniformis identifiziert. Forscher versuchen, die Strukturen des Enzyms aus anderen Quellen zu erhalten, um das molekulare Fundament der Katalyse besser zu verstehen. Daher sind auch wichtige Informationen zur Katalysekinetik erforderlich, um den katalytischen Prozess zu erläutern, und genaue Aktivitätsassays sind für solche Forschungen unerlässlich. Creative Enzymes führt zuverlässige spektrophotometrische Assays durch, die eine hohe Effizienz und Genauigkeit über andere Methoden hinaus bieten. Das Prinzip dieser Methode besteht darin, die freigesetzte Glukose durch Kopplung mit Oxidationsreaktionen zu detektieren.

Abbildung: Die Kristallstruktur von Bacillus licheniformis Trehalose-6-phosphat Hydrolase (TreA), Mutant R201Q, im Komplex mit PNG.
Referenz: Lin, M.-G. et al. Acta Crystallogr D Struct Biol 2016 72: 59-70.

Creative Enzymes ist eines der wenigen Unternehmen, die Aktivitätsassay-Dienstleistungen für Alpha, Alpha-Phosphotrehalase anbieten können. Die geeigneten Assay-Methoden basieren auf dem umfassenden Wissen über die Eigenschaften des Enzyms. Basierend auf unserem standardisierten Fortschritt und Qualitätsmanagement unterliegt jeder Test einer strengen Kontrolle und hohen Reproduzierbarkeit. Insgesamt ist Creative Enzymes die beste Wahl für vertragliche Enzymforschung.