Messung der Enzymaktivität von Arabinan-Endo-1,5-α-L-Arabinanase

Creative Enzymes hat sich seit dem Einstieg in die Enzymindustrie vor mehreren Jahren zu einem erstklassig bewerteten Dienstleister entwickelt. Auf Basis von Hunderttausenden von Aktivitätstests haben wir umfangreiche Erfahrung in der Methodenentwicklung und Prozessoptimierung aufgebaut. Mit zusätzlicher Unterstützung durch modernste Geräte kann Creative Enzymes hochpräzise Assay-Services für praktisch jedes Enzym anbieten. Besonders versiert sind wir in der Prüfung von Hydrolasen, wie z. B. Arabinan-Endo-1,5-α-L-Arabinanase.

Endo-1,5-α-L-Arabinanase (ABNs, E.C. 3.2.1.99) katalysieren die Hydrolyse des α-1,5-verknüpften L-Arabinofuranosid-Rückgrats pflanzlicher Zellwand-Arabinane und setzen dabei Arabinooligosaccharide und Arabinose frei, die zweithäufigste Pentose in der Natur. Gemäß der CAZy-Klassifikation sind ABNs überwiegend in der GH-Familie 43 zu finden. Bis heute wurden aufgrund der begrenzten Verbreitung nur wenige ABNs aus verschiedenen Gattungen von Bacillus, Pseudomonas und Aspergillus beschrieben.

Trotz der begrenzten Diversität sind ABNs für die Bioenergieproduktion von Bedeutung. Arabinan kommt hauptsächlich in Samen, Früchten und Gemüse vor. In Schließzellen spielen Arabinan-Ketten eine Schlüsselrolle bei der Bestimmung der Flexibilität der Zellwand, was als essenziell für die Funktion der Stomata nachgewiesen wurde. ABNs sind Schlüsselenzyme beim Abbau von Arabinan in pflanzlichen Zellwänden. Die Produkte wie Arabinose und Arabino-Oligosaccharide besitzen potenzielle Anwendungen als kalorienarmer Süßstoff und als Präbiotika. Diese Enzyme gelten zudem als vielversprechende Werkzeuge für die umweltfreundliche Umwandlung von Biomasse in Energie und Chemikalien, da Pentosen ebenfalls als Kohlenstoffquellen genutzt werden können. Daher richten sich zunehmend Studien auf die Entwicklung einer hohen katalytischen Effizienz des Enzyms aus, wobei die Bestimmung der Enzymaktivität die Grundlage für weiterführende Forschung darstellt. Die hydrolytische Aktivität von ABNs kann durch den Nachweis reduzierender Zucker mittels DNS-Methode gemessen werden. Die Absorption wird bei Creative Enzymes mit einem hochmodernen Spektrophotometer überwacht, das einen hohen Probendurchsatz ermöglicht.

Abbildung: Die native Kristallstruktur von Endo-1,5-α-L-Arabinanase aus Bacillus subtilis.
Referenz: De Sanctis, D. et al. FEBS J. 2010 277: 4562-4574.

Creative Enzymes verfügt über eine außergewöhnliche Umsetzungskompetenz im Bereich Enzym-Services. Durch den Einsatz der jüngst entwickelten spektrophotometrischen Assays, kombiniert mit umfassender Expertise und versierten Techniken, kann Creative Enzymes auch in hochkomplexen Systemen präzise Testergebnisse erzielen. Mit dem übergeordneten Ziel, jeden Aktivitätstest für unsere Kunden zu perfektionieren, werden wir die Weiterentwicklung und Optimierung unserer Enzym-Assays kontinuierlich vorantreiben.