Enzymaktivitätsmessung der Blutgruppensubstanz Endo-1,4-Beta-Galactosidase

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Blutgruppen-Substanz endo-1,4-beta-galactosidase (EABase, EC 3.2.1.102) ist das erste entdeckte Mitglied der Glycosidase-Hydrolase-Familie GH98, die ihre Endoglycosidase-Aktivität sowohl auf A-Antigen als auch auf B-Antigen anzeigt. Genauer gesagt katalysiert EABase die Hydrolyse der 1,4-beta-D-galactosyl-Bindungen, die benachbart zu 1,3-alpha-D-galactosyl- oder N-acetylgalactosaminyl-Resten und einem 1,2-alpha-D-fucosyl-Rest sind. EABase entfernt vollständig das gesamte Trisaccharid des A- und B-Antigens von Glykanen auf der Oberfläche der Wirtszellen und hinterlässt die antigen-null roten Blutkörperchen. Die Hauptunterschiede im antigenischen AOB-Gruppensystem bestehen darin, dass die Konsistenz des Trisaccharid-Moiety, das an Glykoproteine und Lipide auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen gebunden ist. Das Trisaccharid des A-Antigens (GalNAcα-1,3-(Fucα-1,2)-Galβ-) endet mit einem N-acetylgalactosamin, während im B-Antigen (Galα-1,3-(Fucα-1,2)-Galβ-) der terminale Zucker Galactose ist. Glykanen von O-Typ-Zellen, die diesen terminalen Zucker nicht haben, präsentieren somit die Kernstruktur α-Fuc-1,2-ß-Gal- und sind für die überwiegende Mehrheit der Individuen nicht antigenisch. Die enzymatische Entfernung des terminalen N-acetylgalactosamins oder der Galactose der A- bzw. B-Antigene, um O-Typ-Blut zu erzeugen, wurde lange als Mittel zur Umwandlung von Erythrozyten in einen universellen und antigen-null Spender-Typ vorgeschlagen, was in der Forschung zur Immunantwort von Bedeutung ist. Die Aktivitätsmessung für dieses Enzym wird normalerweise durch fluorometrische Assays durchgeführt. Creative Enzymes bietet Aktivitätsassay-Dienstleistungen für EABase an, die Ihre Forschung zu Enzymkinetik, Substratspezifität und Mutantenenzymbewertung zufriedenstellen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Blutgruppen-Substanz endo-1,4-beta-galactosidase von Streptococcus pneumoniae.
Referenz: Kwan, D.H. et al. J. Am. Chem. Soc. 2015 137: 5695.

Creative Enzymes ist das einzige Unternehmen, das vollständige Assay-Dienstleistungen für Blutgruppen-Substanz endo-1,4-beta-galactosidase anbieten kann. Wir sind eine Gruppe herausragender Wissenschaftler, die seit vielen Jahren an Enzymaktivitätsassays arbeiten. Creative Enzymes, ausgestattet mit hervorragender Technologie, professionellem Wissen und den fortschrittlichsten Instrumenten, unterstützt die Forschung der Kunden auf hervorragende Weise. Wir werden immer Assay-Dienstleistungen von hoher Zufriedenheit und höchster Qualität anbieten.