Messung der Enzymaktivität der D‑Laktatdehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes verpflichtet sich, Kundinnen und Kunden hochwertige Dienstleistungen zur Bestimmung der Enzymaktivität (Activity Assays) bereitzustellen. Wir sind stolz auf unsere professionelle Technologie, unser exzellentes Team sowie die schnelle und effiziente Detektion der Enzymaktivität, einschließlich der D‑Laktatdehydrogenase.

D‑Laktatdehydrogenasen und L‑Laktatdehydrogenasen (D‑LDH und L‑LDH) reduzieren Pyruvat jeweils zu D‑ bzw. L‑Laktat unter Oxidation von NADH zu NAD+ und katalysieren unter anaeroben Bedingungen den letzten Schritt des glykolytischen Stoffwechselwegs. D‑Laktatdehydrogenase ist auch bekannt als:

• Laktatdehydrogenase
• D‑spezifische Laktatdehydrogenase
• D‑(−)‑Laktatdehydrogenase (NAD+)
• D‑Milchsäuredehydrogenase
• D‑Laktatdehydrogenase

D‑LDHs gehören zu einer großen Superfamilie der D‑2‑Hydroxyacid‑Dehydrogenasen (D‑HydDH), die verschiedene Typen von Dehydrogenasen für D‑Isomere umfasst, wie z. B. D‑Glycerat‑, D‑3‑Phosphoglycerat‑, D‑2‑Hydroxyglutarat‑ und D‑2‑Hydroxyisocaproat‑Dehydrogenasen. Obwohl diese Enzyme stark divergente Primärsequenzen aufweisen, sind ihre Tertiärstrukturen einander sehr ähnlich. Die D‑LDHs aus Lactobacillus besitzen konsistent eine dimerische Struktur aus identischen Untereinheiten und zeigen für das Substrat Pyruvat hyperbolisch geformte Sättigungskurven. In E. coli-Zellen bildet D‑LDH hingegen eine homotetramere Struktur. Bakterielle allosterische D‑LDHs werden üblicherweise durch FBP (Fructose‑1,6‑bisphosphat) aktiviert; eine Inhibition tritt auf, wenn Oxamat im Lösungsmittel vorhanden ist. Die Aktivität der D‑Laktatdehydrogenase wurde durch Messung der Änderung der Absorption bei 340 nm bestimmt, die auf NADH zurückzuführen ist. Creative Enzymes bietet schnelle und präzise Assay‑Methoden zur Detektion nicht nur gereinigter D‑Laktatdehydrogenasen, sondern auch von Proben aus Serum, Plasma, Zelllysaten sowie aus Kultur‑ und Fermentationsmedien.

Abbildung: Die Kristallstruktur der D‑Laktatdehydrogenase aus Escherichia coli.
Referenz: Furukawa et al. AMB Express 2014, 4:76

Creative Enzymes ist in besonderem Maße darauf spezialisiert, Assay‑Dienstleistungen bereitzustellen, und verfügt über umfassende Expertise in der Aktivitätsmessung mittels Spektrophotometrie bzw. in diesem Fall UV/Vis‑Spektroskopie. Professionelle Verfahren und umfangreiche Erfahrung sichern unsere führende Position im Bereich der Enzymaktivitätsassays. Auch künftig wird Creative Enzymes Ihr verlässlicher Partner für sämtliche Anforderungen im Zusammenhang mit Aktivitätsassays sein.