Messung der Enzymaktivität der Endo-α-N-Acetylgalactosaminidase

Creative Enzymes ist ein führender Anbieter im Bereich enzymbezogener Dienstleistungen. Wir haben mit verschiedenen Enzymaktivitäts-Services zu unschlagbaren Preisen eine exzellente Qualität nachgewiesen. Das herausragende Preis-Leistungs-Verhältnis zählt branchenweit zur Spitze. Weitere Vorteile sind unsere umfassende Erfahrung, modernste Instrumentierung, standardisierte Abläufe und präzise Analytik. Wir sind auf die Prüfung der Hydrolaseaktivität spezialisiert, einschließlich Endo-α-N-acetylgalactosaminidase.

Endo-α-N-acetylgalactosaminidase (endo-α-GalNAcase, EC 3.2.1.97) katalysiert die Hydrolyse einer O-glykosidischen α-Bindung zwischen Galactosyl β1,3 N-acetyl-D-galactosamin (Galβ1,3GalNAc) und dem Serin- oder Threoninrest in Muzinen und Muzin-typischen Glykoproteinen aus verschiedenen tierischen Quellen. Dieses O-verknüpfte Disaccharid (Core-1-Typ O-Glykan) gehört zu den am häufigsten vorkommenden Kernstrukturen in Muzin-Glykoproteinen. Es ist als Thomsen-Friedenreich-Antigen (T-Antigen) immunbestimmende Gruppe bekannt und wird als spezifischer Marker für Karzinome verwendet. Endo-α-GalNAcasen wurden aus Clostridium perfringens, Streptococcus pneumoniae, Alcaligenes sp., Bacillus sp. und Bifidobacterium longum gereinigt. Vor einigen Jahren wurde eine Endo-α-N-acetylgalactosaminidase aus Bifidobacterium longum kloniert und der Glycosid-Hydrolase-(GH)-Familie 101 zugeordnet, einer Gruppe, die durch die Entdeckung dieses Enzyms neu etabliert wurde. Das Enzym weist eine sehr enge Substratspezifität auf und kann ausschließlich auf die Core-1-Struktur von O-Glykanen wirken. Für ein aus Streptomyces sp. isoliertes Enzym wurde berichtet, dass es verschiedene O-Glykane aus O-Glykoproteinen wie Muzin und Fetuin freisetzen kann. Diese Endo-α-GalNAcasen setzen O-verknüpfte Oligosaccharide aus Glykoproteinen frei, ohne das Proteinrückgrat zu schädigen, wodurch diese Enzyme leistungsfähige Werkzeuge für die Untersuchung von Struktur und Funktion von O-Glykanen darstellen. Endo-α-GalNAcase findet zudem Anwendung in der Analytik. Beispielsweise eignet sie sich ideal zur Untersuchung der Verteilung und Funktion Muzin-typischer Glykoproteine auf Oberflächen normaler und maligner Zellen. In der Folge haben die vielversprechenden Eigenschaften und Funktionen des Enzyms zahlreiche Forschende dazu veranlasst, neue Anwendungen und Produkte zu entwickeln und zu kommerzialisieren. Creative Enzymes bietet gerne die Aktivitätsbestimmung der Endo-α-N-acetylgalactosaminidase an, um solche Vorhaben zu unterstützen. Die Enzymaktivität wird mittels UV-spektrophotometrischem Assay bestimmt, indem die Freisetzung der Produkte überwacht wird.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Endo-α-N-acetylgalactosaminidase aus Bifidobacterium longum (EngBF).
Referenz: Suzuki, R. et al. J. Biochem. 2009 146(3)389–398.

Creative Enzymes ist vollständig darauf vorbereitet, präzise Aktivitätsassays für Endo-α-N-acetylgalactosaminidase bereitzustellen. Dank exzellenter Technologie, fundiertem Fachwissen und modernster Ausstattung bietet Creative Enzymes stets erstklassigen technischen Support sowie maßgeschneiderte Kundenservices zur Unterstützung sämtlicher Forschungszwecke.