Messung der Enzymaktivität der IMP-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes bietet seit Einführung von Enzymaktivitäts-Assays in der Branche ein hohes Serviceniveau und genießt einen ausgezeichneten Ruf. Wir verfügen über professionelle Methoden und modernste Instrumentierung und werden von exzellenten Wissenschaftlerteams mit umfassender Erfahrung unterstützt. Unser Schwerpunkt liegt auf Aktivitätsassays für Oxidoreduktasen, z. B. der IMP-Dehydrogenase.

IMP-Dehydrogenasen gehören zur Familie der Oxidoreduktasen. Dieses Enzym katalysiert die Umwandlung von Inosin-5'-phosphat zu Xanthosin-5'-phosphat unter Verwendung von NAD⁺ als Kofaktor. Es ist auch bekannt als:

• Inosin-5'-monophosphat-Dehydrogenase
• Inosinsäure-Dehydrogenase
• IMPDH

Inosinmonophosphat (IMP) entsteht in der de novo-Biosynthese von Purinnukleotiden. Es ist die Vorstufe sowohl für Adenin- als auch für Guanin-Nukleotide, die als essenzielle Bausteine für die DNA- und RNA-Synthese dienen. Das Enzym IMPDH nimmt in nahezu allen Organismen eine zentrale Stellung ein. Es kontrolliert den einzigen biosynthetischen Weg zu Guanin-Nukleotiden. Aufgrund seiner biologischen Bedeutung ist die IMP-Dehydrogenase daher von herausragender Relevanz. Die durch IMPDH katalysierte Reaktion stellt den ersten irreversiblen und geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Guanin-Nukleotid-Biosynthese dar. Beim Menschen und anderen Säugetieren wird das Enzym durch zwei IMPDH-Gene kodiert, IMPDH1 und IMPDH2. Im Allgemeinen wird humanes IMPDH1 konstitutiv in niedrigen Mengen exprimiert, während IMPDH2 nur während Proliferation und Transformation hochreguliert wird. Insbesondere schnell wachsende Zellen haben einen hohen Bedarf an Guanin-Nukleotiden, der in der Regel nicht über Salvage-Pathways gedeckt werden kann. Folglich muss der Syntheseweg aktiviert werden, um überdurchschnittliche Mengen an Guanin-Nukleotiden bereitzustellen, was die Schlüsselrolle von IMPDH bei Krebserkrankungen und Virusinfektionen weiter unterstreicht. Damit hat sich das Enzym als attraktives Target für antiparasitäre, antivirale, antibakterielle und immunsuppressive Therapien etabliert. Entsprechend wurden IMPDHs aus unterschiedlichen Organismen biochemisch und strukturell charakterisiert, um ihr therapeutisches Potenzial zu erschließen. Tatsächlich deuten neuere Studien bereits darauf hin, dass Methyopropamin (MPA) und Benzamid-Ribosid zu den Inhibitoren zählen. Angesichts der steigenden Nachfrage nach Assays zur Bestimmung der IMP-Dehydrogenase-Aktivität unterstützt Creative Enzymes die biomedizinische Forschung mit modernsten spektrophotometrischen Tests. Die Enzymaktivität kann bei 260 nm oder 340 nm detektiert werden, basierend auf dem Verbrauch von NAD⁺ bzw. der Bildung von NADH.

Abbildung: Die Kristallstruktur der IMP-Dehydrogenase aus Ashbya gossypii.
Referenz: Rubén M. Buey et al. Appl Microbiol Biotechnol. 2015 99:9577-89

Creative Enzymes gehört zu den wenigen Unternehmen, die einen umfassenden Assay-Service für IMP-Dehydrogenase anbieten. Auf Basis unserer langjährigen Erfahrung und der Expertise unserer Spezialisten können wir präzise Studien- und Prüfpläne entsprechend den Anforderungen jedes Kunden erstellen. Für sämtliche Forschungszwecke ist Creative Enzymes stets Ihre erste Wahl für Enzymaktivitätsprüfungen.