Messung der Enzymaktivität der L‑Gulonat‑3‑Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes ist ein professioneller Dienstleister für präzise und zuverlässige Aktivitätsmessungen. Unsere umfassende Erfahrung in der Bereitstellung schneller und effizienter Testmethoden gewährleistet exakte Assay-Ergebnisse. Darüber hinaus ist Creative Enzymes auf die Analyse von Enzymen spezialisiert, die von anderen Anbietern nur selten bestimmt werden. Eines dieser Enzyme, die L‑Gulonat‑3‑Dehydrogenase, wurde bei Creative Enzymes jedoch bereits umfassend charakterisiert und mittels einzigartiger Technologien zuverlässig gemessen.

Die L‑Gulonat‑3‑Dehydrogenase (GDH; EC 1.1.1.45) ist eine Oxidoreduktase, die die Umwandlung von L‑Gulonat zu 3‑Dehydro‑L‑Gulonat katalysiert und dabei NADH als Reaktionsprodukt bildet. GDH zeigt zudem Dehydrogenaseaktivität gegenüber mehreren weiteren organischen Säuren mit 3‑Hydroxylgruppen, wie z. B. L‑3‑Hydroxybutyrat und L‑Threonat. Weitere gebräuchliche Bezeichnungen dieses Enzyms sind:

• L‑3‑Aldonat‑Dehydrogenase;
• L‑3‑Aldonsäure‑Dehydrogenase;
• L‑Gulonsäure‑Dehydrogenase;
• L‑beta‑Hydroxysäure‑Dehydrogenase;
• L‑beta‑Hydroxy‑Säure‑NAD⁺‑Oxidoreduktase;
• L‑3‑Hydroxysäure‑Dehydrogenase

Die L‑Gulonat‑3‑Dehydrogenase ist ein NAD⁺-abhängiges Enzym. Sie spielt eine Schlüsselrolle im Uronat‑Zyklus, einem alternativen Glukosestoffwechselweg, der für die Biosynthese funktioneller Moleküle wie Glucuronid, Glykosaminoglykanen und Ascorbinsäure essenziell ist. Das Enzym kommt in verschiedenen Geweben von Säugetieren sowie in Drosophila melanogaster vor. Beim Menschen ist GDH jedoch nur in Nicht‑Linsen‑Geweben nachweisbar, und ihre Expression ist in hepatozellulären Karzinomgeweben von Patientinnen und Patienten herunterreguliert. Bislang ist als einzige kristallographische Struktur der L‑Gulonat‑3‑Dehydrogenase die des Enzyms aus Kaninchen beschrieben. Daher werden weitere strukturbiologische Daten auf Basis von Kristallstrukturen von GDH aus anderen Quellen benötigt, um das funktionelle Profil dieser noch jungen Enzymgruppe besser zu verstehen. Zur Deckung des Forschungsbedarfs bietet Creative Enzymes geeignete Aktivitätsassays an, die die wachsende Lücke zwischen dem enzymologischen Kenntnisstand und dem zunehmenden Interesse an der industriellen Nutzung dieses Enzyms adressieren. Wir haben zuverlässige spektrophotometrische Assays etabliert, um die Enzymaktivität zu quantifizieren. Da NAD⁺ und NADH unterschiedliche UV‑Absorptionsprofile aufweisen, kann die katalytische Aktivität von EC 1.1.1.45 durch Verfolgung entweder der Reduktion von NAD⁺ bei 260 nm oder der Oxidation von NADH bei 340 nm mittels UV/Vis‑Spektrometer bestimmt werden.

Abbildung: Die Kristallstruktur der L‑Gulonat‑3‑Dehydrogenase aus Kaninchen.
Referenz: Yukuhiko Asada et al. J. Mol. Biol. 2010 401: 906–920

Creative Enzymes ist zweifellos ein führender Anbieter im Bereich der Enzymaktivitätsassays. Wir verfügen über modernste Ausstattung und unvergleichliche Methoden zur Bestimmung der Enzymaktivität. Mit exzellenten Dienstleistungen und hochwertigen Prüfungen wächst Creative Enzymes dank der Unterstützung tausender Kundinnen und Kunden kontinuierlich, und wir möchten Ihr Unternehmen in naher Zukunft unterstützen und Ihr Vertrauen gewinnen.