Messung der Enzymaktivität der Malatdehydrogenase (Oxalacetat-decarboxylierend) mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes bietet mithilfe modernster Geräte und exzellenter Methoden den bestmöglichen Service zur Messung der Enzymaktivität. In den vergangenen Jahren hat Creative Enzymes Tausenden von Wissenschaftlern und Forschern dabei geholfen, Aktivitätstests an einer Vielzahl von Enzymen durchzuführen, darunter Malatdehydrogenase (Oxalacetat-decarboxylierend).

Malatdehydrogenase (Oxalacetat-decarboxylierend) ist eine oxidative Decarboxylase, die die Umwandlung von L‑Malat zu Pyruvat und Kohlendioxid katalysiert und dabei ein zweiwertiges Metallion wie Mg²⁺ oder Mn²⁺ sowie NAD⁺ als Kofaktoren nutzt. Das Enzym kommt sowohl in Prokaryoten als auch in Eukaryoten vor. Im Gegensatz zu EC 1.1.1.39 kann dieses Enzym auch exogenes Oxalacetat decarboxylieren. Es ist auch bekannt als:

• Malic Enzyme (mehrdeutig);
• Pyruvat‑Malat‑Carboxylase (mehrdeutig);
• NAD⁺-spezifisches Malic Enzyme;
• NAD⁺-Malic Enzyme;
• NAD⁺-gekoppeltes Malic Enzyme

Ein Sequenzvergleich von Malatdehydrogenasen (Oxalacetat-decarboxylierend) aus unterschiedlichen Quellen zeigt eine signifikante Homologie innerhalb dieser Enzymfamilie. Aufgrund ihrer funktionellen Bedeutung wurde das Enzym aus mehreren Quellen isoliert und charakterisiert. Beispielsweise spielt das mitochondriale NAD‑Malic Enzyme (m‑NAD·ME) aus dem parasitischen Nematoden Ascaris suum eine Schlüsselrolle im Kohlenhydratstoffwechsel parasitischer Würmer. Im anaeroben Stoffwechsel von A. suum wird Malat, ein Intermediat des glykolytischen Stoffwechselwegs des Wurms, in die Mitochondrien transportiert, wo es eine Dismutation durchläuft und über die Malic‑Enzyme‑Reaktion zu Pyruvat und NADH umgesetzt wird. Die Verbindung kann zudem zu Fumarat umgewandelt werden, das anschließend über Succinat zu kurzkettigen, verzweigten Fettsäuren umgesetzt wird, vermittelt durch das in der Malic‑Enzyme‑Reaktion gebildete NADH. Daraus wird ersichtlich, dass Malatdehydrogenase (Oxalacetat-decarboxylierend) eine wichtige Rolle bei der Generierung reduzierender Äquivalente (NADH) für die Umwandlung mehrerer biologisch bedeutsamer Moleküle spielt. Dieses Enzym ist außerdem an weiteren Stoffwechselwegen beteiligt, wie z. B. Photosynthese, Lipogenese und Energiestoffwechsel. Eine sachgerechte Messung der Enzymaktivität unterstützt die Anwendung dieses Enzyms unmittelbar. Creative Enzymes bietet einen schnellen und zuverlässigen Assay‑Service, der Ihre Anforderungen vollständig erfüllt.

Abbildung: Kristallstruktur der Malatdehydrogenase (Oxalacetat-decarboxylierend) aus Ascaris suum im Komplex mit Nicotinamidadenindinukleotid.
Referenz: Coleman DE et al. Biochemistry. 2002 41(22):6928-38

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