Messung der Enzymaktivität der N‑Acylmannosamin‑1‑Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes widmet sich mit umfassendem Engagement Enzym-Assay-Services. Mit modernster Ausstattung und einem professionellen Forschungsteam zählen wir zu den führenden Anbietern im Bereich enzymologischer Dienstleistungen. Durch wiederholte Prüfungen der Enzymaktivität von Oxidoreduktasen haben wir umfangreiche Erfahrung aufgebaut. Daher können wir schnelle und zuverlässige Assay-Services zur Bestimmung der enzymatischen Aktivität anbieten, einschließlich N‑Acylmannosamin‑1‑Dehydrogenase.

N‑Acylmannosamin‑1‑Dehydrogenase gehört zur SDR‑(Short‑Chain Dehydrogenase/Reductase-)Superfamilie und katalysiert eine seltene, NAD⁺-abhängige Oxidationsreaktion von ManNAc (N‑Acetyl‑D‑Mannosamin) zu N‑Acetylmannosamino‑Lacton, das spontan zu N‑Acetylmannosaminsäure hydrolysiert. Dieses Enzym wurde bislang in keinem anderen Organismus als Flavobacterium sp. nachgewiesen und ist derzeit das einzige Enzym, das diese Reaktion katalysiert. Das Enzym wird auch unter folgenden Bezeichnungen geführt:

• N‑Acylmannosamin‑Dehydrogenase;
• N‑Acetyl‑D‑Mannosamin‑Dehydrogenase;
• N‑Acyl‑D‑Mannosamin‑Dehydrogenase

N‑Acylmannosamin‑1‑Dehydrogenase ist am Sialinsäurekatabolismus in Bakterien beteiligt. Die häufigste Form der Sialinsäure ist Neu5Ac (N‑Acetylneuraminsäure), die als Biomarker für bestimmte tumoröse und inflammatorische Zustände gilt, wodurch ihre Quantifizierung im Serum von Bedeutung ist. In Mikroorganismen wird Neu5Ac in Pyruvat und ManNAc gespalten. Üblicherweise wird dieses Zwischenprodukt in biologischen Prozessen über eine Reihe enzymkatalysierter Reaktionen zu Fructose‑1,6‑bisphosphat umgesetzt. In dem Bodenbakterium Flavobacterium sp. 141‑8 existiert jedoch ein einzigartiger Stoffwechselweg, der mit der Fähigkeit korreliert, auf ManNAc als alleiniger Kohlenstoffquelle zu wachsen. Das hierfür verantwortliche, einzigartige Enzym ist die N‑Acyl‑D‑Mannosamin‑Dehydrogenase, die in keinem anderen Mikroorganismus gefunden wurde. Zu diesem speziellen Stoffwechselweg liegen bislang nur wenige Studien vor, und die nachfolgenden Reaktionen nach der Bildung von N‑Acetylmannosaminsäure sind weiterhin unbekannt. Daher besteht ein großes wissenschaftliches Interesse, dieses Enzym und den zugehörigen Stoffwechselweg besser zu verstehen. Das Enzym ist derzeit kommerziell als Bestandteil eines Sialinsäure‑Assay‑Kits für klinische Testungen erhältlich. Viele weitere potenzielle Anwendungen sind zu erwarten, sobald das Enzym besser untersucht und charakterisiert ist. Unabhängig davon, ob Ihr Interesse in der Aufklärung von Stoffwechselwegen oder in der Enzymentwicklung aus neuen Quellen liegt, unterstützt Creative Enzymes Ihre Forschung durch die Bereitstellung präziser Enzym‑Assay‑Services.

Abbildung: Kristallstruktur der N‑Acetyl‑D‑Mannosamin‑Dehydrogenase mit NAD aus Flavobacterium sp. 141‑8.
Referenz: Agust´ın SOLA‑CARVAJAL et al. Biochem. J. 2014 462, 499–511

Creative Enzymes gehört zu den wenigen Unternehmen, die Assay‑Services für N‑Acylmannosamin‑1‑Dehydrogenase anbieten. Wir verfügen über modernste spektrophotometrische Instrumentierung und ein leistungsstarkes Expertenteam. Die hohe Servicequalität wurde von zahlreichen Kunden bestätigt. Auch künftig wird Creative Enzymes konsequent höchste Prüfqualität sicherstellen, um Ihre Forschung zu unterstützen.