Messung der Enzymaktivität der Kreatinkinase

Creative Enzymes ist ein industrielles Biotechnologieunternehmen, das auf enzymatische Assays spezialisiert ist. Wir arbeiten mit unseren vielfältigen und einzigartigen Kunden partnerschaftlich zusammen, um sie bei der Entwicklung neuer Produkte und der Prozessoptimierung zu unterstützen. Der höchste Qualitätsstandard unserer Dienstleistungen ist eine der Säulen unseres globalen Erfolgs und die Grundlage für eine hohe Kundenzufriedenheit. Creative Enzymes bietet Ihnen hierzu gerne einen präzisen Aktivitätsassay für Kreatinkinase an.

Kreatinkinase (EC 2.7.3.2; ATP:Kreatin-N-Phosphotransferase; CK) ist ein Enzym, das die reversible Übertragung der N-Phosphorylgruppe von Mg-ATP auf Kreatin (Cr) katalysiert, wobei Phosphokreatin (PCr) und Mg-ADP entstehen. Dieses Enzym wurde zunächst in kristalliner Form aus der Skelettmuskulatur des Kaninchens isoliert. Kreatinkinase gehört zur Familie der Phosphagen-(Guanidino-)Kinasen, die hochkonserviert ist und im gesamten Tierreich vorkommt. Kreatinkinase ist die einzige Phosphagenkinase, die bei Wirbeltieren vorkommt; sie findet sich jedoch auch bei vielen Wirbellosen, z. B. bei Schwämmen, Vielborstern und Stachelhäutern. Es gibt vier Isoenzyme der Kreatinkinasen, benannt nach ihrer subzellulären Lokalisation. Beispielsweise existieren zwei zytosolische Formen, die Muskel- (MM-CK) und die Gehirnform (BB-CK). Darüber hinaus gibt es zwei mitochondriale Formen, die ubiquitäre (uMt-CK) und die sarkomerische (sMt-CK) Form, die anhand ihres isoelektrischen Punktes unterschieden werden.

Abbildung 1: Die von der Kreatinkinase katalysierte Reaktion.
Referenz: McLeish M J, Kenyon G L. Critical Reviews in Biochemistry and Molecular Biology, 2005, 40(1): 1–20.

Kreatinkinase ist an einem wichtigen System zur Aufrechterhaltung der Energiehomöostase in Zellen mit hohem und schwankendem Energiebedarf beteiligt. Die hohen Kreatinkinase-Spiegel stellen sicher, dass die ADP- und ATP-Konzentrationen nahezu konstant bleiben und die Zelle dadurch wirksam gegen eine rasche ATP-Depletion gepuffert wird. Darüber hinaus hat Kreatinkinase auch eine klinisch relevante Bedeutung: Der Kreatinkinase-Spiegel kann routinemäßig als Indikator für Myokard- und Skelettmuskelerkrankungen sowie im Rahmen der Therapie des akuten Myokardinfarkts herangezogen werden. Folglich spielt Kreatinkinase eine wesentliche Rolle in der Energiehomöostase und in der Diagnostik. Daher erscheint die Messung der Enzymaktivität der Kreatinkinase für weiterführende klinische und pharmazeutische Forschung erforderlich.

Auf Basis langjähriger Erfahrung in Enzymtests und Methodenoptimierung ist Creative Enzymes umfassend qualifiziert, den enzymatischen Assay für Kreatinkinase präzise anzubieten. Die Aktivität der Kreatinkinase wird mittels kontinuierlicher spektrophotometrischer Analyse unter Verwendung gekoppelter Enzymsysteme bestimmt. Die Reaktion in Vorwärtsrichtung (Bildung von Phosphokreatin) kann bei 340 nm verfolgt werden, indem an Pyruvatkinase und Laktatdehydrogenase gekoppelt wird. Umgekehrt kann die ATP-Bildung ebenfalls bei 340 nm verfolgt werden, indem an Hexokinase und Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase gekoppelt wird. Die Qualität unserer Testergebnisse ist weltweit hoch anerkannt und im Markt belegt. Viele Kunden sind Creative Enzymes seit vielen Jahren treu. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihre beste Wahl für jede Entwicklung im Zusammenhang mit Kreatinkinase.

Abbildung 2: Die Kristallstruktur der humanen Kreatinkinase vom Gehirntyp.
PDB: 3DRB