Enzymaktivitätsmessung für N-Acylneuraminat-Cytidylyltransferase

Creative Enzymes ist ein biotechnologisches Unternehmen, das sich auf Enzymaktivitätsassays spezialisiert hat. Wir arbeiten mit verschiedenen und einzigartigen Kunden zusammen, um ihre Bedürfnisse in der Grundlagenforschung bis hin zur Prozessoptimierung zu unterstützen. Durch ständiges Streben nach Dienstleistungen von höchster Qualität hat Creative Enzymes das Vertrauen vieler Kunden gewonnen. Wir sind eines der wenigen Unternehmen, die den hochgenauen Aktivitätsassay für N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase anbieten.

Sialinsäuren sind an einer Vielzahl von Signal-, Erkennungs- und Zell-Zell-Adhäsionsphänomenen in Säugetierzellen beteiligt und werden in einigen hochmalignen Tumoren überexprimiert. Es wurde gezeigt, dass die veränderten physiologischen Werte von Sialinsäuren eng mit bestimmten genetischen Störungen verbunden sein können. Offensichtlich ist der Mechanismus der Produktion von sialinsäurehaltigen Glykokonjugaten von klinischem Interesse. N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase (EC 2.7.7.43; CTP:N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase; CMP-Neu5Ac-Synthetase) ist ein Enzym, das den vorletzten Schritt bei der Addition von Sialinsäuren an die Oligosaccharidkomponente von Glykokonjugaten katalysiert und ein erforderlicher Bestandteil der Sialylierungswege ist. Dieses Enzym katalysiert die Reaktion von N-Acetylneuraminsäure (NeuAc) mit Cytidin-5-Triphosphat (CTP), um ein Pyrophosphat (PP_i) und CMP-N-Acetylneuraminsäure (CMP-NeuAc), ein „aktiviertes“ Zuckernukleotidmonophosphat, zu produzieren. Diese Reaktion ist einzigartig, da die Sialinsäure direkt an Cytosinmonophosphat gekoppelt ist. N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase wurde sowohl aus Säugetier- als auch aus Bakterienquellen isoliert. Obwohl bakterielle und eukaryotische N-Acylneuraminat-Cytidyltransferasen mehrere gemeinsame katalytische Eigenschaften teilen, wurden viele kritische Unterschiede untersucht, einschließlich der Substratspezifität, der tertiären Struktur, der Inhibitorsensitivität und der zellulären Lokalisation. Daher können bakterielle N-Acylneuraminat-Cytidyltransferasen durch rationale Arzneimittel-Design-Strategien gezielt werden.

Abbildung 1: Enzymatische Synthese von CMP-NeuAc durch N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase (CMP-Neu5Ac-Synthetase).
Referenz: Kittelmann M, Klein T, Kragl U, et al. Angewandte Mikrobiologie und Biotechnologie, 1995, 44(1-2): 59-67.

Zusätzlich gewinnt die N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase auch im Bereich der Biotechnologie an Bedeutung. Angesichts der Kosten für die chemische Synthese von CMP-NeuAc und seiner Instabilität sind N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase zusammen mit verschiedenen Sialyltransferasen entscheidend für die enzymatische Synthese biologisch relevanter, sialylierter Oligosaccharide. Diese sialylierte Oligosaccharide werden in der klinischen Medizin verwendet und sind wertvolle Werkzeuge für das Studium der verschiedenen Prozesse, die Sialinsäuren erfordern. Daher kann man schließen, dass die N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase ein enormes Potenzial für zukünftige Entdeckungen in der Medizin und Biotechnologie hat.

Dennoch ist der Aktivitätsassay der N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase mittels chromatographischem Assay auf industrieller Ebene noch nicht gut etabliert, obwohl der chromatographische Assay als zuverlässige und kosteneffektive Methode zur Aktivitätsquantifizierung gilt. Glücklicherweise hat Creative Enzymes als weltweit anerkanntes Unternehmen im Bereich der Enzymaktivitätsmessung präzise Aktivitätsassays für N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase entwickelt. Die Qualität unserer Ergebnisse ist mit den fortschrittlichsten chromatographischen Instrumenten gewährleistet. Letztendlich ist Creative Enzymes Ihr vertrauenswürdiger Partner, der Ihnen sicherlich das beste Serviceerlebnis auf dem globalen Markt bieten wird.

Abbildung 2: Die Kristallstruktur der murinen N-Acylneuraminat-Cytidyltransferase.
PDB: 1QWJ