Enzymaktivitätsmessung für Nukleosid-Diphosphat-Kinase

Creative Enzymes ist ein weltweit führendes Unternehmen, das sich auf die Entwicklung, Optimierung und Bereitstellung analytischer Dienstleistungen spezialisiert hat. Creative Enzymes ist auf dem globalen Markt gut anerkannt und erstellt innovative Enzymaktivitätsassays, die mit den fortschrittlichsten Instrumenten durchgeführt werden. Der beste technische Support und der personalisierte Kundenservice gehören zur Spitzenklasse der Branche. Hier sind wir stolz darauf, den zuverlässigen Enzymaktivitätsassay für Nukleosid-Diphosphat-Kinase anzubieten.

Die Familie der Nukleosid-Diphosphat-Kinasen (EC 2.7.4.6; ATP:Nukleosid-Diphosphat-Phosphotransferase) besteht aus einer spezifischen Gruppe von ubiquitär vorkommenden Hauskeeping-Phosphotransferasen. Sie sind daran beteiligt, den Pool der intrazellulären Nukleosidtriphosphate (NTPs) aufrechtzuerhalten, die für die Biosynthese erforderlich sind, indem sie die nicht-substratspezifische Umwandlung von Nukleosid-Diphosphat (NDP) zu NTP katalysieren. Insbesondere katalysiert die Nukleosid-Diphosphat-Kinase den reversiblen Transfer einer terminalen γ-Phosphorylgruppe (P) von NTP zu NDP, wobei ein hochenergetisches phosphoryliertes und konserviertes Histidinrest (His) als Zwischenprodukt durch einen Ping-Pong-Mechanismus beteiligt ist. Nukleosid-Diphosphat-Kinasen wurden aus verschiedenen Organismen und Zelltypen isoliert, einschließlich Prokaryoten, niederen und höheren Eukaryoten, Maus, Ratte und Mensch. Sie sind ubiquitär verteilt, insbesondere im Zellkern, im Zytoplasma in Verbindung mit Mikrotubuli, auf der Zelloberfläche, in den Mitochondrien und in der extrazellulären Flüssigkeit. Eukaryotische Nukleosid-Diphosphat-Kinasen sind Homohexamere, während bakterielle Nukleosid-Diphosphat-Kinasen Homotetramere sind.

Nukleosid-Diphosphat-Kinasen spielen eine entscheidende Rolle in vielen Aspekten: (1) Die Enzyme können ATP als Donor verwenden, um die nicht-adenylierten NTPs zu synthetisieren, die für die Nukleinsäuresynthese und mehrere wichtige metabolische Zwischenprodukte, einschließlich UDP-Glukose und einiger CDP-Lipid-Derivate, benötigt werden; (2) Die Enzyme katalysieren die Transphosphorylierung zwischen GTP, das im Krebs-Zyklus produziert wird, und ADP; (3) Die Enzyme können GTP für die Proteinsynthese, G-Protein-Signalgebung und Tubulin-Polymerisation bereitstellen. Darüber hinaus wurden Nukleosid-Diphosphat-Kinasen in der biologischen Regulation von Wachstum, Entwicklung, Apoptose und Differenzierung gefunden. Außerdem können die Enzyme als Hemmung der Metastasierung in Tumoren, der Aktivität der histidinabhängigen Proteinkinase und der 3’-5’ Exonuklease-Aktivität wirken. Darüber hinaus fördern Nukleosid-Diphosphat-Kinasen auch die Tumorbildung und spielen mehrere Rollen in der normalen Entwicklung und Zellproliferation. Daher ziehen Nukleosid-Diphosphat-Kinasen ein immer wachsendes Interesse aufgrund ihrer verschiedenen bedeutenden Funktionen auf sich.

Creative Enzymes ist in der Lage, den präzisesten enzymatischen Assay für Nukleosid-Diphosphat-Kinasen durchzuführen. Die Aktivität der Nukleosid-Diphosphat-Kinasen wird spektrophotometrisch durch einen gekoppelten Assay bestimmt. Die ATP-Bildung durch die Kinase-Reaktion ist gekoppelt an die Reduktion von NADP⁺ (oder die ADP-Bildung war gekoppelt an die NADH-Oxidation), und der Fortschritt der Reaktion wird durch die Überwachung der Änderung der Absorption bei 340 nm verfolgt. Die Qualität unserer Ergebnisse ist auf professionelle und zeitgerechte Weise gewährleistet, unterstützt durch die fortschrittlichsten spektrophotometrischen Instrumente, die führenden Techniken und ein hervorragendes Expertenteam. Letztendlich ist Creative Enzymes Ihre optimale Wahl für jede Forschung, die Nukleosid-Diphosphat-Kinasen betrifft.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Nukleosid-Diphosphat-Kinase aus Dictyostelium discoideum.
PDB: 1PAE