Messung der Enzymaktivität der Adenylatkinase

Creative Enzymes setzt alle Ressourcen dafür ein, jedem Kunden außergewöhnliche Leistungen zu bieten. Wir haben ein umfassendes System zur Durchführung von Aktivitätsassays etabliert, um sämtliche Anforderungen zu erfüllen. Sowohl die professionellen Methoden als auch die umfangreiche Erfahrung von Creative Enzymes unterstützen Sie bei der Bestimmung der Adenylatkinase-Aktivität.

Adenylatkinase (EC 2.7.4.3, AK) ist ein Phosphotransferase-Enzym, das die reversible Übertragung der terminalen Phosphatgruppe zwischen Adeninnukleotiden katalysiert. ATP dient als Donor und AMP als Akzeptor, wobei zwei Moleküle ADP entstehen. Die Enzymaktivität ist in hohem Maße von Mg²⁺ abhängig. Die katalysierte Reaktion erfordert als erstes Substrat ein mit Mg²⁺ komplexiertes Nukleotid (Mg²⁺-ATP-Komplex) und als zweites Substrat ein freies Nukleotid.

Adenylatkinase ist essenziell für Zellwachstum und Zellvermehrung. Dieses Enzym ist in der Zelle in hoher Menge vorhanden und ist an mehreren Stoffwechselwegen beteiligt, darunter die de novo-Biosynthese von Adenosinribonukleotiden, die Biosynthese von Antibiotika sowie der Purinstoffwechsel. Die unverzichtbare Rolle dieses Enzyms zeigt sich in der metabolischen Steuerung und der Energiehomöostase. In der Signaltransduktion kann AK AMP-abhängige metabolische Signale erkennen und an metabolische Sensoren weiterleiten und damit die Dekodierung zellulärer Informationen unterstützen. Im Energiestoffwechsel können durch AK die zwei energiereichen Phosphorylgruppen im ATP-Molekül bereitgestellt werden. Daher ist AK an der Regulation des Energieflusses beteiligt. Zahlreiche klinische Erkrankungen stehen im Zusammenhang mit einem AK-Mangel. So kann ein Mangel in Erythrozyten zu hämolytischer Anämie führen, einer seltenen hereditären Erythroenzymopathie. Zu den klinischen Manifestationen zählen geistige Retardierung und psychomotorische Beeinträchtigungen. Angesichts der klinischen Relevanz konzentriert sich eine wachsende Zahl von Studien auf den Aktivitätsnachweis und die medizinische Forschung. Zur Unterstützung dieser Arbeiten bietet Creative Enzymes hochsensitive und zugleich flexiblere Methoden an, um unterschiedliche Anforderungen zu erfüllen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Wildtyp-Adenylatkinase aus E. coli im Komplex mit Ap5A (Diadenosinpentaphosphat).
Referenz: Schrank, T.P. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2009 106: 16984–16989.

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