Messung der Enzymaktivität der (d)CMP-Kinase

Creative Enzymes ist das führende Unternehmen im Bereich der Enzymaktivitätsassays. Insbesondere verfügen wir über ausgewiesene Expertise in der Transferase-Testung. Die professionellen Abläufe und hochwertigen Dienstleistungen von Creative Enzymes unterstützen Forschende und Innovatoren bei verschiedensten Aktivitätsassays für unterschiedliche Zielsetzungen. Auf Basis unserer modernen Geräteausstattung können wir präzise Messungen für (d)CMP-Kinase anbieten.

(d)CMP-Kinase ist ein prokaryotisches Enzym aus der Familie der Nukleosidmonophosphat-(NMP)-Kinasen. Im Unterschied zu eukaryotischen Enzymen phosphoryliert die prokaryotische (d)CMP-Kinase spezifisch CMP bzw. dCMP zu CDP bzw. dCDP, wobei ATP als bevorzugter Phosphatdonor dient. Für die katalytische Reaktion ist die Anwesenheit von Mg²⁺ erforderlich.

Nukleosidmonophosphat-Kinasen sind Schlüsselenzyme im Nukleotidstoffwechsel. Bei der (d)CMP-Kinase handelt es sich um einen zentralen Faktor in der Biosynthese von Nukleosidvorstufen. Konkret ist dieses Enzym am Salvage-I-Stoffwechselweg der Pyrimidinribonukleoside beteiligt; das Produkt CDP wird anschließend weiter phosphoryliert, wodurch CTP entsteht – ein wesentliches biologisches Zwischenprodukt für RNA, DNA und Phospholipide. Von den verschiedenen Quellen ist die (d)CMP-Kinase aus E. coli am umfassendsten untersucht. Die Gesamtstruktur des Enzyms ähnelt der anderer NMP-Kinasen. Neben den essenziellen Funktionen für das Zellwachstum wurden weitere Anwendungen in der Biotechnologie erschlossen. So kann beispielsweise durch Überexpression der (d)CMP-Kinase eine Ganzzell-Biokatalyse zur Gewinnung von CTP realisiert werden. In jüngerer Zeit fokussieren sich zunehmend Studien auf unterschiedliche Derivate und Modifikationen. In diesem Zusammenhang kann Creative Enzymes weiterführende Forschung zu diesem Enzym durch zuverlässige Aktivitätsassays unterstützen, die auf modernsten spektrophotometrischen Instrumenten durchgeführt werden. Wir testen nicht nur gereinigte Enzyme, sondern auch Enzyme in Zelllysaten, Geweben und anderen enzymhaltigen Lösungen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der (d)CMP-Kinase aus Escherichia coli.
Referenz: Briozzo, P. et al. Structure 1998 6: 1517-1527.

Creative Enzymes gehört zu den wenigen Unternehmen, die kundenspezifische Aktivitätsassay-Services für (d)CMP-Kinase anbieten können. Unser Forschungszentrum zeichnet sich durch modernste Ausstattung, umfangreiche Erfahrung und ein professionelles Team aus. Creative Enzymes wird auch künftig Aktivitätsmessungen mit hoher Reproduzierbarkeit und Genauigkeit bereitstellen.