Messung der Enzymaktivität der Hypoxanthin-Phosphoribosyltransferase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes zeichnet sich durch außergewöhnliche Methoden und umfassende Expertise aus. Unterstützt durch modernste Geräteausstattung kann Creative Enzymes exzellente Assay-Services für Transferasen anbieten. Wir verfügen über fundierte Kenntnisse in spektrophotometrischen Assays und freuen uns, präzise und zuverlässige Assay-Services für Hypoxanthin-Phosphoribosyltransferase bereitzustellen.

Die Hypoxanthin-Phosphoribosyltransferase (HPRT) ist in einer Vielzahl von Organismen weit verbreitet. Sie katalysiert die magnesiumabhängige reversible Übertragung einer Phosphoribosylgruppe von 5-Phospho-α-D-ribosyl-1-pyrophosphat (PRPP) auf eine Purinbase zur Bildung eines Purinribonukleotids, Inosinmonophosphat (IMP) oder Guanosinmonophosphat (GMP).

Wie allgemein bekannt, sind Purinnukleotide essenziell für die Synthese von DNA und RNA. Darüber hinaus liefern sie Energie und fungieren als Kofaktoren. Für die Biosynthese von Purinnukleotiden sind zwei Wege bekannt: der de novo-Weg und der Salvage-Weg. Der Salvage-Weg zeichnet sich im Vergleich zur de novo-Synthese der Stickstoffbasen durch einen geringeren Energieaufwand aus. Die Hypoxanthin-Phosphoribosyltransferase (HPRT, EC 2.4.2.8) ist ein Schlüsselenzym im Purin-Salvage-Stoffwechselweg. Aufgrund einer ausgeprägten Einschränkung des de novo-Wegs sind viele parasitäre Organismen auf HPRT angewiesen, um exogene Purinbasen zu salvagieren und daraus Purinnukleotide zu synthetisieren. Daher ist dieses Enzym für das Überleben parasitärer Protozoen von entscheidender Bedeutung und wurde als potenzielles Target für die Entwicklung therapeutischer Inhibitoren gegen Parasiten vorgeschlagen. Beim Menschen ist HPRT nicht essenziell, jedoch hat ein genetisch bedingter Funktionsdefekt erhebliche Auswirkungen auf die Gesundheit. Ein vollständiger HPRT-Mangel ist mit einer X-chromosomal vererbten Erkrankung, dem Lesch-Nyhan-Syndrom, assoziiert, das klinisch durch Hyperurikämie, geistige Retardierung, Choreoathetose und zwanghafte Selbstverstümmelung gekennzeichnet ist. Ein partieller HPRT-Mangel ist ebenfalls mit Hyperurikämie assoziiert, die zur Entwicklung von Gicht und Nephrolithiasis führt. Daher werden zunehmend Studien durchgeführt, die auf ein besseres Verständnis des katalytischen Mechanismus abzielen, der mit klinischen Erkrankungen in Zusammenhang steht. Präzise Aktivitätsassay-Methoden leisten hierzu einen wesentlichen Beitrag, und Creative Enzymes kann entsprechende Forschung durch zuverlässige Assay-Services mittels spektrophotometrischer Analytik unterstützen.

Abbildung: Die Kristallstruktur von HPRT aus Bacillus anthracis. PDB: 3O7M

Creative Enzymes ist in den vergangenen Jahren stark gewachsen und hat sich zu einem führenden Anbieter für Enzymaktivitätsassays entwickelt. Unsere Aktivitäten sind auf schnelle und präzise Services für unsere Kunden ausgerichtet. Auch künftig wird Creative Enzymes weiterhin erstklassige Dienstleistungen für die Enzymindustrie bereitstellen.