Enzymaktivitätsmessung für 1,4-Alpha-Glucan-Verzweigungsenzym unter Verwendung von spektrophotometrischen Assays

Creative Enzymes ist ein führendes Unternehmen, das hochwertige bioanalytische Dienstleistungen und maßgeschneiderte Auftragsforschung anbietet, die auf die Analyse der Enzymaktivität spezialisiert sind. Wir bedienen die Bedürfnisse zahlreicher Kunden aus der pharmazeutischen, biotechnologischen und chemischen Industrie. Voll ausgestattet mit den fortschrittlichsten spektrophotometrischen Instrumenten sind wir stolz darauf, den zuverlässigen Aktivitätsassay für das 1,4-alpha-Glucan-verzweigende Enzym professionell und zeitnah anzubieten.

Das 1,4-alpha-Glucan-verzweigende Enzym gehört zur Familie der α-Amylasen 13 und enthält drei Domänen: eine aminoterminale Domäne, die an der Bestimmung der Kettenlänge beteiligt ist, eine carboxyterminalen Domäne, die an der Substratauswahl und der katalytischen Kapazität beteiligt ist, und eine zentrale (α/β) Fasskatalysatordomäne. Das 1,4-alpha-Glucan-verzweigende Enzym (EC 2.4.1.18, 1,4-alpha-D-Glucan:1,4-alpha-D-Glucan 6-alpha-D-(1,4-alpha-D-Glucano)-Transferase) spielt eine wichtige Rolle bei der Bestimmung der Struktur von Stärke in Pflanzen und von Glykogen in Tieren und Bakterien, da es α-1,4-verknüpfte Glucoseeinheiten vom äußeren nicht-reduzierenden Ende einer Glykogenkette in eine α-1,6-Position derselben oder benachbarter Ketten überträgt und so Glykogenverzweigungen schafft. Stärke und Glykogen sind Megadalton-große Glucosepolymere und dienen als das Hauptreservoir für sofort verfügbare Energie und Kohlenstoffverbindungen in den meisten lebenden Organismen, von Archaeen, Bakterien und Hefen bis hin zu höheren Eukaryoten, einschließlich Pflanzen und Tieren. Das Wachstum der Glykogenkette hängt von verzweigende Enzymen wie dem 1,4-alpha-Glucan-verzweigenden Enzym ab. Die Verzweigungsreaktion erhöht die Anzahl der nicht-reduzierenden Enden und macht Glykogen reaktiver für Synthese und Verdauung. Sie ist auch entscheidend für die Sicherstellung der Löslichkeit von Glykogen in der Zelle. Glykogenvorräte in der Leber sind entscheidend für die Aufrechterhaltung der Blutzuckerhomöostase, während Glykogen in Herz- und Skelettmuskeln zur Energieversorgung der Muskelkontraktion verwendet wird. Die Ansammlung von unlöslichem Glykogen in der Zelle ist als Glykogenspeicherkrankheit Typ IV (GSD IV) bekannt und wird durch Mutationen des 1,4-alpha-Glucan-verzweigenden Enzyms verursacht. GSD IV in seinen verschiedenen Formen betrifft die Leber, das Muskelgewebe oder das zentrale und periphere Nervensystem. Daher kann geschlossen werden, dass das 1,4-alpha-Glucan-verzweigende Enzym eine zentrale Rolle bei der Behandlung der Krankheit spielt. Dieses Enzym kann auch in der Produktion von Lebensmittelzutaten und diätetischer Ernährung verwendet werden.

Creative Enzymes ist voll kompetent, den genauen Aktivitätsassay für das 1,4-alpha-Glucan-verzweigende Enzym bereitzustellen. Die Aktivität dieses Enzyms kann spektrophotometrisch durch die Messung des Rückgangs der Absorption des sichtbaren Lichts bei 520 nm bestimmt werden, obwohl andere technische Schwierigkeiten, wie die Löslichkeit des Substrats und die Inkubationsbedingungen, den Aktivitätsassay weiterhin beeinträchtigen können. Nichtsdestotrotz engagiert sich Creative Enzymes dafür, die beste technische Unterstützung und einen personalisierten Kundenservice für alle Branchen anzubieten.

Abbildung: Die Kristallstruktur des menschlichen Glykogen-verzweigenden Enzyms (GBE1).
PDB: 4BZY