Enzymatische Aktivitätsmessung für Hyaluronan-Synthase unter Verwendung chromatographischer Assays

Nach Jahren der Entdeckung und Entwicklung ist Creative Enzymes als weltweit führendes Unternehmen in der Enzymaktivitätsbestimmung hervorgetreten. Creative Enzymes wächst weiterhin mit demselben unternehmerischen und innovativen Geist, der die Natur mit der Wissenschaft verbindet. Als Enzymhersteller erfüllt Creative Enzymes stets die Anforderungen unserer Kunden und unterstützt die nächste Entwicklungsstufe und ist daher die beste Wahl mit zufriedenstellenden Dienstleistungen. Als eine der hervorgehobenen Dienstleistungen bieten wir die genaue Aktivitätsmessung für Hyaluronan-Synthase an.

Hyaluronan-Synthasen (EC 2.4.1.212; HASs) sind die membranbindenden Glykosyltransferasen, die für die Biosynthese von Hyaluronan (HA) verantwortlich sind. Sie sind duale Enzyme, die sowohl UDP-α-D-Glucuronsäure als auch UDP-α-N-Acetyl-D-Glucosamin an zwei verschiedenen aktiven Stellen binden, die abwechselnd die Bildung von zwei verschiedenen glykosidischen Bindungen in Anwesenheit von entweder Mg²⁺ oder Mn²⁺ katalysieren. Bei Säugetieren wird HA von drei homologen HAS-Enzymen produziert: HAS1, HAS2 und HAS3. Diese Enzyme sind hochspezifisch für UDP-GlcNAc und UDP-GlcA, und ähnliche Enzyme wurden in einer Vielzahl von Organismen gefunden.

HA ist ein Glykosaminoglykan-Polymer, das aus wiederholten N-Acetylglucosamin β(1,4) Glucuronsäure β(1,3) Disaccharideinheiten besteht. Es bindet eine große Menge Wasser, was den Geweben hohe Viskosität und Elastizität verleiht. HA spielt eine entscheidende Rolle während der Befruchtung, Embryogenese, Entwicklung und Differenzierung. Darüber hinaus beteiligt sich HA auch an einer Vielzahl von zellulären Funktionen und Verhaltensweisen, einschließlich Zellmigration, Phagozytose und Proteoglykanassemblierung. Darüber hinaus spielt HA eine kritische Rolle bei der Gewebeumgestaltung, der normalen Gewebehomöostase und Krankheiten wie osteoartikulären Pathologien, entzündlichen Erkrankungen und Gefäßerkrankungen. Außerdem kann HA auch als Arzneimittelabgabesystem, kosmetischer Inhaltsstoff und als Analgetikum verwendet werden. Angesichts der vielfältigen Funktionen von HA sind HASs die wichtigen Enzyme in allen biologischen Aktivitäten, da die Enzyme direkt auf die Biosynthese von HA wirken.

Obwohl HASs enzymologisch charakterisiert wurden, gibt es nur wenige berichtete Studien über ihre Struktur und Mechanismus. Einer der Gründe für die begrenzte Menge an mechanistischen Informationen ist das Fehlen eines praktischen Aktivitätstests. Hier ist Creative Enzymes voll kompetent, um den präzisen Aktivitätstest für HASs bereitzustellen. Die HAS-Aktivität wird unter Verwendung von UDP-[¹⁴C]GlcA durch Chromatographie überwacht. Die Incorporation von UDP-[¹⁴C]GlcA in hochmolekulares HA wurde durch absteigende Papierchromatographie gemessen.

Unser Forschungszentrum zeichnet sich durch die fortschrittlichste Ausstattung, eine lange Forschungsgeschichte und ein außergewöhnliches Expertenteam aus, die die hohe Reproduzierbarkeit und Genauigkeit der Aktivitätsmessung gewährleisten. Wir liefern die Produkte in der kürzest möglichen Zeit ab dem Datum der Auftragserteilung. In Zukunft wird Creative Enzymes weiterhin Ihr Geschäft mit unseren spezialisierten Dienstleistungen unterstützen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der menschlichen Hyaluronan-Synthase 2.
UniProt: Q92819