Enzymaktivitätsmessung für Purin-Nukleosid-Phosphorylase unter Verwendung spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes ist ein führendes Unternehmen für hochwertige bioanalytische Dienstleistungen. Wir bieten vertragliche personalisierte Forschung, die auf die Analyse der Enzymaktivität spezialisiert ist und die Bedürfnisse unserer Kunden aus der ganzen Welt erfüllt. Voll ausgestattet mit den fortschrittlichsten spektrophotometrischen Instrumenten werden alle Tests professionell und zeitnah durchgeführt. Hier sind wir stolz darauf, den zuverlässigen Aktivitätstest für Purin-Nukleosid-Phosphorylase anzubieten.

Purin-Nukleosid-Phosphorylase (EC 2.4.2.1; PNPase) ist ein Enzym, das die reversible Umwandlung von Purin-Nukleosiden (Inosin und Guanosin) und Desoxynukleosiden (Desoxyinosin und Desoxyguanosin) in ihre jeweiligen Purinbasen und in Pentose-1-Phosphat katalysiert. Purin-Nukleosid-Phosphorylase ist ein ubiquitär vorkommendes Enzym, das im Salvage-Stoffwechselweg eine wichtige Rolle spielt und für die ordnungsgemäße Synthese und den Abbau von DNA in einer lebenden Zelle notwendig ist.

Purin-Nukleosid-Phosphorylasen können weiter in zwei Klassen unterteilt werden: trimere und hexamere. Trimere Purin-Nukleosid-Phosphorylasen, auch bekannt als Säugetier-Purin-Nukleosid-Phosphorylase, sind spezifisch für 6-Oxopurin-Nukleoside und kommen sowohl in höheren Organismen als auch in Prokaryoten vor. Hexamere Purin-Nukleosid-Phosphorylasen finden sich nur in niederen Organismen und haben eine breitere Substratspezifität, da sie sowohl 6-Amino- als auch 6-Oxopurin-Nukleoside akzeptieren. Obwohl die aktiven Seitenreste von trimeren und hexameren Purin-Nukleosid-Phosphorylasen erhebliche Unterschiede aufweisen, wird angenommen, dass die Mechanismen ähnlich sind. Die Unterschiede in der Substratspezifität zwischen den hexameren und trimeren Purin-Nukleosid-Phosphorylasen deuten auf eine Strategie für die Antikrebs-Suizidgentherapie hin. Daher ziehen Purin-Nukleosid-Phosphorylasen ein immer wachsendes Interesse für die Anwendung in der Krebstherapie auf sich. Darüber hinaus führt das Fehlen der Aktivität der trimeren Purin-Nukleosid-Phosphorylase beim Menschen zu selektiver Immunschwäche, was auf die fehlerhafte T-Zell-Proliferation zurückzuführen ist. Daher würde die Entwicklung neuer selektiver immunsuppressiver Medikamente und Antikrebsmittel von der Entdeckung der Enzyminhibitoren profitieren.

Um die funktionale Bedeutung der Purin-Nukleosid-Phosphorylasen zu untersuchen, ist es von erheblicher Bedeutung, die Aktivität der Purin-Nukleosid-Phosphorylasen überwachen zu können. Zu diesem Zweck hat Creative Enzymes den genauen Aktivitätstest für Purin-Nukleosid-Phosphorylasen bereitgestellt, basierend auf umfangreicher Erfahrung in der Erforschung der Enzyme und der Optimierung der Methode. Die Aktivität dieses Enzyms wird bei 293 nm durch die spektrophotometrische Messung der Freisetzung von Harnsäure bestimmt.

Nach Jahren der Entdeckung und Entwicklung hat sich Creative Enzymes als weltweit führend in den Dienstleistungen zur Messung der Enzymaktivität etabliert. Unabhängig von den Herausforderungen, die auf Ihrem Weg zu Enzymanwendungen liegen mögen, wird Creative Enzymes immer die Anforderungen für die nächste Phase erfüllen und Ihre beste Wahl als Dienstleister sein.

Abbildung: Die Kristallstruktur der E. coli Purin-Nukleosid-Phosphorylase Hexamer.
Referenz: Bennett E M, et al. Journal of Biological Chemistry, 2003, 278(47): 47110-47118.