Messung der Enzymaktivität der NAD+-Kinase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes hat sich in kurzer Zeit zu einem der professionellsten Anbieter von Enzym-Services weltweit entwickelt. Seit mehreren Jahren liegt unser Schwerpunkt auf der Aktivitätsprüfung von Transferasen. Auf Basis modernster Geräteausstattung und umfassender Expertise sind unsere Fachspezialisten in der Lage, die am besten geeigneten Aktivitätsservices für NAD⁺-Kinase bereitzustellen.

NAD⁺-Kinase (NADK, EC 2.7.1.23) katalysiert die Phosphorylierung von Nicotinamidadenindinukleotid (NAD⁺) zu NADP⁺, wobei ATP als Phosphatgruppendonor dient. NADKs wurden in Bakterien, Pflanzen, Wirbeltieren und beim Menschen identifiziert. NADKs liegen in Lösung als multimerer Komplex vor, und zweiwertige Metalle – in der Regel Magnesium – sind für die Ausübung ihrer Aktivität essenziell.

Die katalytische Reaktion ist in Organismen universell, da es sich um die einzige bekannte Reaktion handelt, die NADP⁺ erzeugt. Das Produkt NADP⁺ ist ein essenzielles Koenzym in vivo. Die wichtigste Funktion von NADP⁺ besteht in der Aufrechterhaltung eines Pools reduzierender Äquivalente für metabolische Systeme, die die Zelle vor Schädigungen schützen. Darüber hinaus ist NADPH, die reduzierte Form von NADP⁺, für die Regeneration aller bekannten oxidativen Abwehrsysteme – wie Glutathion, Thioredoxin und Peroxiredoxine – unverzichtbar. Zudem liefert NADPH die Reduktionsäquivalente für biosynthetische Prozesse wie die Fettsäurebiosynthese und die Nukleotidsynthese. Aufgrund der Beteiligung an kritischen Wachstumsprozessen und des Zusammenhangs mit Hyperproliferation ist NADK zu einem attraktiven Zielmolekül für die Krebstherapie geworden. Studien zeigen, dass Thionicotinamid und andere Nicotinamid-Analoga potenzielle Inhibitoren der NADK sind und die Behandlung von Kolonkarzinomzellen mit Thionicotinamid wirksam zu sein scheint. Zur Identifizierung weiterer potenzieller Arzneistoffkandidaten für die klinische Anwendung wurden umfangreiche Forschungsarbeiten zur Suche nach hochspezifischen Inhibitoren durchgeführt. In diesem Prozess ist eine zuverlässige Aktivitätsbestimmung der entscheidende Schritt zur Charakterisierung des Enzyms und zur Identifizierung von Inhibitoren. Creative Enzymes hat die Fähigkeit nachgewiesen, zuverlässige und geeignete Aktivitätsassays für NAD⁺-Kinase durchzuführen, die jedem Forschungszweck gerecht werden.

Abbildung: Die Kristallstruktur einer NAD⁺-Kinase aus Archaeoglobus fulgidus im Komplex mit NAD⁺.
Referenz: Liu, J. et al. J.Mol.Biol. 2005 354: 289–303.

Creative Enzymes ist seit jeher stark in der Enzym-Servicebranche präsent. Wir verfügen über professionelle technische Unterstützung durch spezialisierte Enzymologen. Unsere hochwertigen Dienstleistungen werden von zahlreichen Kunden bestätigt. Um Ihre Forschung bestmöglich zu unterstützen, wird Creative Enzymes das kontinuierliche Lernen und die Weiterentwicklung in diesem Bereich fortsetzen.