Enzymaktivitätsmessung der Phosphorylase-Kinase

Nach umfangreicher Erfahrung und experimentellen Fähigkeiten in den vergangenen Jahren hat sich Creative Enzymes schnell zu einem der professionellsten Enzymdienstleistungsunternehmen entwickelt. Basierend auf den tiefgreifenden Fachkenntnissen und den modernsten Instrumenten hat unser Wissenschaftlerteam die Fähigkeit, jede Enzymtestung durchzuführen. Die Phosphorylase-Kinase-Assays basieren auf der zuverlässigen spektrophotometrischen Methode.

Phosphorylase-Kinase (PHK) ist die erste entdeckte Proteinkinase. Dieses Enzym katalysiert spezifisch die Phosphorylierung eines einzelnen Serinrückstands und wandelt damit inaktive Phosphorylase b (GPb) in aktive Glykogen-Phosphorylase a (GPa) um. PHK benötigt Ca²⁺ und Calmodulin für seine Aktivität.

Phosphorylase-Kinase (PHK) ist ein Schlüsselenzym, das an der Kontrolle des Glykogenabbaus beteiligt ist. Das Enzym integriert extrazelluläre Signale. Es kombiniert Signale, die aus der Interaktion von Hormonrezeptoren oder aus neuronalen Impulsen, die durch Calcium vermittelt werden, mit denen, die aus intrazellulären Ereignissen stammen. Dadurch wird eine streng kontrollierte Kinaseaktivität bereitgestellt, die die Glykogen-Phosphorylase reguliert. Die Strukturstudien haben gezeigt, dass das Enzym aus vier Arten von Untereinheiten besteht, mit einer Stöchiometrie von (αβγδ)4. Die α- und β-Untereinheiten sind regulatorisch und die Ziele für die Kontrolle durch Phosphorylierung. Die γ-Untereinheit ist die katalytische Untereinheit, und die δ-Untereinheit ist im Wesentlichen identisch mit Calmodulin und verleiht Calciumempfindlichkeit. Der Mangel an PHK hat offensichtliche klinische Manifestationen wie langsame körperliche Entwicklung in der Kindheit und ungewöhnliche Vergrößerung der Leber. Die Krankheit kann durch die abnormal reduzierte katalytische Aktivität definiert werden. Es ist zu erkennen, dass ordnungsgemäße Enzymaktivitätstests zur Diagnose der Krankheit beitragen werden. Um solche Bemühungen zu erleichtern, bietet Creative Enzymes gezielte Methoden an, um unterschiedlichen Forschungsbedürfnissen gerecht zu werden.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Phosphorylase-Kinase von Oryctolagus cuniculus.
Referenz: Skamnaki VT et al. Biochemistry. 1999 38(44): 14718-14730.

Creative Enzymes ist eines der wenigen Unternehmen, das präzise Assays der Phosphorylase-Kinase anbietet. Die genaue Testmethode liefert zuverlässigere Ergebnisse als universelle Kinase-Aktivitätskits. Die Kapazität und Flexibilität der Aktivitätsassays von Creative Enzymes haben viele Kunden beeindruckt. Mit dem Ziel, die ultimative Leistung bei der Aktivitätsmessung zu erreichen, wird Creative Enzymes niemals aufhören zu lernen und sich weiterzuentwickeln.