Messung der Enzymaktivität der Polyphosphatkinase

Creative Enzymes ist für seine hervorragende Leistungsfähigkeit bei der Messung von Enzymaktivitäten bekannt. Zu unseren herausragenden Vorteilen zählen erfahrene Fachexperten, automatisiertes Datenmanagement, standardisierte Qualitätskontrollen sowie belastbare, verlässliche Ergebnisse. Die Assay-Services werden fristgerecht und mit hoher Genauigkeit durchgeführt. Wir sind auf die Prüfung von Transferasen wie der Polyphosphatkinase spezialisiert.

Die Polyphosphatkinase (PPK, EC 2.7.4.1) katalysiert die Verlängerung von anorganischem Polyphosphat (polyP) unter Verwendung von ATP als Phosphatgruppendonor. Dieses Enzym ist weit verbreitet – von pathogenen Bakterien bis hin zu Säugetieren. Für die katalytische Reaktion ist bei den meisten Enzymen die Beteiligung von Mg²⁺ erforderlich; ein Teil benötigt hingegen Mn²⁺.

Polyphosphat (polyP) ist ein lineares Polymer aus anorganischem Phosphat. PolyP stellt eine strukturelle Einheit dar, die eine wesentliche Bedeutung für die bakterielle Pathogenese besitzt. Es steht im Zusammenhang mit Stressantworten bei Nährstofflimitierung und unter kritischen Umweltbedingungen. Durch die rasche Bildung von polyP wird die Transkription zahlreicher stressinduzierbarer und stationärphaseninduzierbarer Gene beeinflusst. PolyP ist zudem an der Regulation des Abbaus ribosomaler Proteine beteiligt. Aufgrund seiner Rolle bei der Katalyse der polyP-Bildung hat die Polyphosphatkinase große Aufmerksamkeit erlangt. Es wurde gezeigt, dass PPK essenziell für Motilität, Quorum Sensing und Biofilmbildung ist und damit maßgeblich zur Antibiotikaresistenz klinisch relevanter Pathogene beiträgt. Gleichzeitig ist PPK aufgrund ihrer unverzichtbaren Funktion bei der Freisetzung von Virulenzfaktoren zu einem attraktiven Ziel für antimikrobielle Wirkstoffe geworden. Inhibitoren dieses Enzyms werden zudem zur Eradikation nicht proliferierender Bakterien eingesetzt. Obwohl die einzigartige Sequenz, die sich von anderen Proteinfamilien unterscheidet, die Forschung erschwert, konzentriert sich weiterhin eine Vielzahl von Studien auf PPK sowie polyP. Die Aktivitätsmessung ist ein effizientes Mittel für das Screening von Inhibitoren. Zu diesem Zweck bietet Creative Enzymes sensitive und robuste Aktivitätsassays sowohl für gereinigte Enzyme als auch für intrazelluläre Enzyme an.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Polyphosphatkinase aus Escherichia coli.
Referenz: Zhu, Y. et al. Embo Rep. 2005 6: 681-687.

Die Polyphosphatkinase-Assays von Creative Enzymes übertreffen universelle Kinase-Assay-Kits. Die Messung ist sowohl schnell als auch präzise. Darüber hinaus sind wir in der Lage, für unterschiedliche Anforderungen maßgeschneiderte, zielgerichtete Konzepte zu entwickeln. Die Ergebnisse sind durch hohe Reproduzierbarkeit und geringe Variabilität abgesichert. Die Enzymaktivitäts-Assay-Services von Creative Enzymes sind die optimale Wahl für Ihre Forschung.