Messung der Enzymaktivität der N-Acetyllactosaminid-3-α-Galactosyltransferase

Creative Enzymes erzielt in der Enzymdienstleistungsbranche stets herausragende Ergebnisse. Modernste Instrumentierung, ausgewiesene Fachexpertise und präzise, routinierte Abläufe begründen unsere Stärken und differenzieren Creative Enzymes klar vom Wettbewerb. Wir sind spezialisiert auf kundenspezifische Aktivitätsassays für Transferasen, einschließlich der N‑Acetyllactosaminid‑3‑α‑Galactosyltransferase.

UDP‑Galactose‑β‑Galactosyl‑α‑1,3‑Galactosyltransferase (α3GT, EC 2.4.1.87, vormals EC 2.4.1.124 und EC 2.4.1.151), ein Mitglied der Glycosyltransferase(GT)-Familie 6, ist eine „retaining“ GT, die die Übertragung von Galactose aus UDP‑α‑D‑Galactose in eine α‑1,3‑Bindung an β‑Galactosylgruppen in Glycokonjugaten katalysiert. Die katalytische Reaktion erfordert UDP als Kofaktor sowie bestimmte zweiwertige Kationen wie Mn²⁺ und Mg²⁺.

α3GT und seine Produkte kommen bei den meisten Säugetieren vor; beim Menschen werden jedoch aufgrund inaktivierender Mutationen keine aktiven Enzymformen gebildet. Das Fehlen seiner Produkte, zusammenfassend als α‑Gal‑Epitop bezeichnet, führt zur Bildung natürlicher Antikörper, die gegen diese Strukturen gerichtet sind. Solche Antikörper dienen als Abwehrmechanismus gegen Infektionen durch pathogene Mikroorganismen und Viren, stellen jedoch zugleich eine wesentliche Hürde für die Xenotransplantation von Organen aus Spezies dar, die aktive Formen von α3GT exprimieren. In jüngeren Studien wurden die Strukturen von Wildtyp‑α3GTs und deren Mutanten aufgeklärt, was ein tieferes Verständnis biologischer Zusammenhänge in der Glycobiologie auf struktureller Grundlage ihrer Spezifität und katalytischen Aktivität ermöglicht hat. Darüber hinaus wurden auch Immunantworten untersucht, die mit humanen Erkrankungen assoziiert sind. Die Aktivitätsmessung stellt jedoch eine Lücke zwischen Forschung und Industrialisierung dar, da die Enzymaktivität leicht verloren geht. So sind beispielsweise Mutanten aus Bos taurus unter Assaybedingungen nicht stabil. Zur Lösung dieses Problems hat Creative Enzymes schnelle und präzise Assays entwickelt, um die Aktivität zu bestimmen, bevor sie signifikant abfällt.

Abbildung: Kristallstruktur der α‑1,3‑Galactosyltransferase im Komplex mit UDP‑2F‑Galactose
Referenz: Jamaluddin H et al. J Mol Biol. 2007 369(5): 1270–1281.

Creative Enzymes verpflichtet sich, jede Prüfung nach hohen Standards und gemäß professionellen Protokollen durchzuführen. Unsere Assay‑Services wurden bislang nicht beanstandet, was die hohe Qualität und Kundenzufriedenheit in der Enzymdienstleistungsbranche unterstreicht. Künftig werden die wachsenden Erfahrungen von Creative Enzymes Ihre Transferase‑Forschung noch besser unterstützen.