Messung der Enzymaktivität von Endo-β-N-Acetylglucosaminidasen

Creative Enzymes ist ein industrielles Biotechnologieunternehmen, das auf Enzymaktivitätsassays spezialisiert ist. Wir arbeiten mit einer Vielzahl unterschiedlicher und spezialisierter Kunden zusammen, um deren Anforderungen in der frühen Forschungsphase sowie bei der Prozessoptimierung zu unterstützen. In den vergangenen Jahren hat Creative Enzymes konsequent höchste Kundenzufriedenheit angestrebt und seine Produkte, Dienstleistungen sowie sein Qualitätsmanagementsystem kontinuierlich verbessert. In diesem Zusammenhang freuen wir uns, die zuverlässigste enzymatische Messung für Endo-β-N-acetylglucosaminidasen anbieten zu können.

Endo-β-N-acetylglucosaminidasen (EC 3.2.1.96) sind eine Gruppe von Enzymen, die die Hydrolyse der β-1,4-glykosidischen Bindung der N,N’-Diacetylchitobiose-Einheit im Kern asparaginverknüpfter Glycane verschiedener Glykoproteine und Glykopeptide katalysieren. Endo-β-N-acetylglucosaminidasen können als nützliche Werkzeuge zur Aufklärung der Funktionen von Oligosacchariden in Glykoproteinen dienen, da die Enzyme Oligosaccharide freisetzen können, ohne die Proteinanteile zu schädigen. Diese Enzyme sind weit verbreitet in Tieren, Pflanzen, Pilzen und Bakterien. Mehrere bakterielle Enzyme, wie Endo-H, das von Streptomyces plicatus sezerniert wird, und Endo-F₁, das von Flavobacterium meningosepticum sezerniert wird, wurden kloniert und der Familie 18 der Glykosidhydrolasen (GH) zugeordnet. Die übrigen Endo-β-N-acetylglucosaminidasen unterscheiden sich von den Enzymen der GH18-Familie und werden der GH-Familie 85 zugeordnet. Endo-H ist hochspezifisch für Hybrid- und High-Mannose-Glycane und verarbeitet keine komplexen Oligosaccharide. Für die hydrolytische Aktivität benötigt dieses Enzym als minimales Substrat α-Man-(1→3)-α-Man-(1→6)-ß-Man-(1→4)-ß-GlcNAc-(1→4)-GlcNAc-Asn. Endo-F₁ weist eine ähnliche Substratspezifität wie Endo-H sowie einen hohen Grad an Sequenzhomologie auf, einschließlich 32 % Identität auf Aminosäuresequenzebene. Endo-H ist eines der am häufigsten verwendeten enzymatischen Reagenzien in der Glykoproteinforschung und wird umfassend in Studien zur Struktur und Funktion asparaginverknüpfter Oligosaccharide eingesetzt. Seine Selektivität für spezifische Oligosaccharidstrukturen sowie die Komplexität seiner Glykoproteinsubstrate machen es besonders interessant für kristallographische Analysen. Entsprechend führt diese Nutzung zu einer hohen Nachfrage nach der Überwachung der Aktivität von Endo-β-N-acetylglucosaminidasen.

Glücklicherweise stellt Creative Enzymes präzise Aktivitätsassays für Endo-β-N-acetylglucosaminidasen bereit. Mit einem erfahrenen Team exzellenter Enzymologen, modernster Technologie und fortschrittlicher Instrumentierung gewährleisten wir die Durchführung der Aktivitätsprüfung professionell und termingerecht. Auch künftig wird Creative Enzymes seine Dienstleistungen als Ihr vertrauenswürdiger Partner fortführen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Endo-beta-N-acetylglucosaminidase H aus Streptomyces plicatus.
PDB: 1EDT