Messung der Enzymaktivität der Inositol-2-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Auf der Basis eines starken Teams erfahrener Enzymologen hat sich Creative Enzymes als führender Anbieter in der Entwicklung von Aktivitätsassays etabliert, um unterschiedlichste Anforderungen an den Nachweis und die Charakterisierung von Enzymen zu erfüllen. Die Zuverlässigkeit unserer Ergebnisse wird durch modernste spektrophotometrische Technologie gewährleistet. Unsere Kunden überzeugen wir durch hochpräzise und reproduzierbare Messungen, insbesondere bei der Bestimmung der Aktivität der Inositol-2-Dehydrogenase.

Inositol-2-Dehydrogenase (EC 1.1.1.18) gehört zur Familie der Oxidoreduktasen, insbesondere zu den Enzymen, die auf die CH-OH-Gruppe als Elektronendonor wirken und NAD⁺ (Nicotinamidadenindinukleotid) oder NADP⁺ (Nicotinamidadenindinukleotidphosphat) als Elektronenakzeptor verwenden. Sie katalysiert die NAD-abhängige Oxidationsreaktion, bei der myo-Inositol, ein carbocyclisches Polyol, zu 2,4,6/3,5-Pentahydroxycyclohexanon umgesetzt wird. Das Enzym ist am Inositolstoffwechsel und am Inositolphosphatstoffwechsel beteiligt. Es ist weithin bekannt, dass myo-Inositol, die bedeutendste natürliche Form von Inositol, die strukturelle Grundlage der Inositolphosphate bildet, die als Gerüstkomponenten in Zusammenhang mit verschiedenen sekundären Botenstoffen in eukaryotischen Zellen fungieren sowie an Zellwachstum, Apoptose, Zellmigration, Endozytose und Zelldifferenzierung beteiligt sind. Darüber hinaus wurde berichtet, dass diese Reaktion auch in weitere Stoffwechselwege involviert ist, beispielsweise in die Streptomycin-Biosynthese, die Biosynthese von Antibiotika sowie den mikrobiellen Stoffwechsel in unterschiedlichen Umgebungen. Der systematische Name dieser Enzymklasse lautet myo-Inositol:NAD⁺ 2-Oxidoreduktase. Weitere gebräuchliche Bezeichnungen sind:

• Myo-Inositol-2-Dehydrogenase;
• Myo-Inositol:NAD⁺-Oxidoreduktase;
• Inositol-Dehydrogenase;
• Myo-Inositol-Dehydrogenase.

Die von der Inositol-2-Dehydrogenase katalysierte chemische Reaktion erfordert die Anwesenheit von NAD⁺. Daher können spektrophotometrische Assays zur kontinuierlichen Messung der enzymatischen Aktivität der Inositol-2-Dehydrogenase eingesetzt werden, indem der Anstieg der Absorption bei 340 nm überwacht wird. Obwohl Aktivitätsassays kommerziell verfügbar sind, basieren die derzeitigen Assays auf dem natürlichen Substrat in einer definierten Konzentration. Die wachsenden Anforderungen in den Lebenswissenschaften und der Biotechnologie erfordern jedoch häufig eine flexiblere Testmethode für verschiedene unnatürliche Substrate. Creative Enzymes verfügt über umfassende Expertise in der kundenspezifischen Assay-Entwicklung und kann Aktivitätsmessungen sowohl für das reine Enzym als auch für Enzymmischungen gegenüber einer breiten Palette von Substraten und Substratkonzentrationen anbieten. Wir haben eine einzigartige Testplattform etabliert und bieten gerne spektrophotometrische Assays für die Inositol-2-Dehydrogenase an.

Abbildung: Die Kristallstruktur der myo-Inositol-Dehydrogenase aus Lactobacillus casei, einschließlich Molekülen der Inositol-2-Dehydrogenase/D-chiro-Inositol-3-Dehydrogenase und des gebundenen Kofaktors NAD.