Enzymaktivitätsmessung für Inositol 2-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Auf der Grundlage eines starken Teams erfahrener Enzymologen ist Creative Enzymes zu einem führenden Unternehmen in der Entwicklung von Aktivitätsassays geworden, um verschiedene Bedürfnisse der Enzymdetektion und -charakterisierung zu erfüllen. Die Zuverlässigkeit unserer Ergebnisse wird durch die spektrophotometrische Technologie gewährleistet, die an der Spitze der Zeit steht. Wir haben unsere Kunden durch die hochgenaue und reproduzierbare Messung beeindruckt, insbesondere für die Aktivität der Inositol-2-Dehydrogenase.

Inositol-2-Dehydrogenase (EC 1.1.1.18) ist ein Mitglied der Familie der Oxidoreduktasen, insbesondere derjenigen, die auf die CH-OH-Gruppe als Elektronendonator wirken, mit NAD⁺ (Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid) oder NADP⁺ (Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid-Phosphat) als Elektronenakzeptor. Es katalysiert die NAD-abhängige Oxidationsreaktion, die Myo-Inositol, ein carbocyclisches Polyol, in 2,4,6/3,5-Pentahydroxycyclohexanon umwandelt. Das Enzym ist am Inositolstoffwechsel und am Inositolphosphatstoffwechsel beteiligt. Es ist weithin bekannt, dass Myo-Inositol, die prominenteste natürliche Form von Inositol, als strukturelle Basis von Inositolphosphaten fungiert, die eine skelettartige Rolle in Bezug auf verschiedene sekundäre Botenstoffe in eukaryotischen Zellen sowie bei Zellwachstum, Apoptose, Zellmigration, Endozytose und Zelldifferenzierung spielt. Es wird auch berichtet, dass diese Reaktion an einigen anderen Stoffwechselwegen beteiligt ist, wie z.B. der Streptomycin-Biosynthese, der Antibiotika-Biosynthese und dem mikrobiellen Stoffwechsel in verschiedenen Umgebungen. Der systematische Name dieser Enzymklasse ist Myo-Inositol:NAD⁺ 2-Oxidoreduktase. Andere gebräuchliche Namen für dieses Enzym sind:

• Myo-Inositol-2-Dehydrogenase;
• Myo-Inositol:NAD⁺ Oxidoreduktase;
• Inositol-Dehydrogenase;
• Myo-Inositol-Dehydrogenase.

Die chemische Reaktion, die von der Inositol-2-Dehydrogenase katalysiert wird, erfordert die Anwesenheit von NAD⁺. Daher können spektrophotometrische Assays verwendet werden, um die enzymatische Aktivität der Inositol-2-Dehydrogenase kontinuierlich zu messen, indem die Zunahme der Absorption bei 340 nm überwacht wird. Obwohl Aktivitätsassays kommerziell erhältlich sind, basieren die aktuellen Assays auf dem natürlichen Substrat in einer bestimmten Konzentration. Die wachsenden Anforderungen in den Lebenswissenschaften und der Biotechnologie erfordern jedoch oft eine flexiblere Testmethode für verschiedene unnatürliche Substrate. Creative Enzymes hat einen starken Hintergrund in der Entwicklung maßgeschneiderter Testdesigns und ist in der Lage, die Aktivitätsmessung des reinen Enzyms oder als Mischung gegen eine Vielzahl von Substraten und Substratkonzentrationen anzubieten. Wir haben eine einzigartige Testplattform etabliert und freuen uns, spektrophotometrische Assays für Inositol-2-Dehydrogenase anzubieten.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Myo-Inositol-Dehydrogenase von Lactobacillus casei, einschließlich Molekülen der Inositol-2-Dehydrogenase/D-chiro-Inositol-3-Dehydrogenase und gebundenem Cofaktor NAD.