Enzymaktivitätsmessung für Mannitol 2-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes ist in der Lage, den zuverlässigen und stabilen Aktivitätsassay von Mannitol 2-Dehydrogenase bereitzustellen, basierend auf jahrzehntelangen Erfahrungen in der Enzymmethodik. Mit unserer starken Expertise in der Enzymforschung und -entwicklung bieten wir Ihnen hochwertige Aktivitätstests und technische Dienstleistungen an.

Mannitol 2-Dehydrogenasen (EC1.1.1.67; MDH) sind die Enzyme, die die NAD⁺/NADP⁺-abhängige reversible Oxidation von D-Mannitol oder D-Mannitol-1-Phosphat zu D-Fructose oder D-Fructose 6-Phosphat katalysieren. Der systematische Name dieser Enzymklasse ist D-Mannitol: NAD⁺ 2-Oxidoreduktase, die auch als Mannitol-Dehydrogenase und D-Mannitol-Dehydrogenase bekannt ist. Sie werden breit in der Landwirtschaft, Pharmazie und chemischen Industrie eingesetzt. Das Enzym ist eine sekundäre Alkohol-Dehydrogenase, die selektiv auf polyhydroxylierte Verbindungen mit der C2(R)-Konfiguration wirkt. Großes Augenmerk wurde auf das Enzym gelegt, aufgrund der potenziellen Anwendungen in der chiralen Synthese. Kürzlich wurde festgestellt, dass Mannitol 2-Dehydrogenase in Pflanzen existiert, mit der Funktion, D-Mannitol in D-Mannose umzuwandeln. Diese Mannitol 2-Dehydrogenasen aus Pflanzen gehören zur Familie der mittelkettenhaltigen, zinkhaltigen Dehydrogenasen, im Gegensatz zu den anderen Mannitol 2-Dehydrogenasen aus Pilzen, die zur Familie der kurzkettigen Dehydrogenasen gehören. Als Oxidoreduktase katalysiert Mannitol 2-Dehydrogenase die CH-OH-Gruppe des Substrats und verwendet NAD⁺ oder NADP⁺ als Cofaktor.

Mannitol 2-Dehydrogenasen spielen eine wichtige Rolle im Mannitol-Zyklus, der für den Fructose- und Mannose-Stoffwechsel unerlässlich ist. Sie nehmen am zweiten Halbzyklus teil, der die Umwandlung von Mannitol umfasst, um D-Fructose wieder in Fructose 6-Phosphat zurückzuführen. D-Mannitol wird im Mannitol-Zyklus aus Fructose 6-Phosphat in zwei enzymatischen Schritten gebildet: der direkten Reduktion von Fructose 6-Phosphat zu D-Mannitol 1-Phosphat und der Hydrolyse des Phosphoesters des Letzteren zur Produktion von D-Mannitol. Unter allen zehn Hexitolen ist D-Mannitol einer der nur drei Hexitole, die natürlich vorkommen. Aufgrund seiner vorteilhaften Füllstoffeigenschaften wird D-Mannitol in der Lebensmittel- und Pharmaindustrie umfassend eingesetzt. Es ist erwähnenswert, dass es keine Karies verursacht und auch für Diabetiker sicher ist. Aufgrund all dieser Vorteile erhalten Mannitol 2-Dehydrogenasen immer mehr Aufmerksamkeit, aber die Aktivitätsassays von Mannitol 2-Dehydrogenasen wurden mit spektrophotometrischen Analysen nicht gut etabliert. Creative Enzymes hat die fortschrittlichste Technologie in der spektrophotometrischen Analyse für Mannitol 2-Dehydrogenasen optimiert und aktualisiert. Daher verpflichten wir uns, unseren Kunden ein Portfolio nachhaltiger, vielseitiger und maßgeschneiderter Lösungen anzubieten, indem wir unsere Innovationskapazität erweitern und unseren technischen Service stärken.

Abbildung: Die Kristallstruktur der P. fluorescens Mannitol 2-Dehydrogenasen.
Referenz: Kathryn L. Kavanagh et al. J Biol Chem. 2002 Nov 8;277(45):43433-42.