Messung der Enzymaktivität der Oligosaccharid-Reduktionsend-Xylanase

Creative Enzymes ist seit vielen Jahren als aktives Biotechnologieunternehmen im Bereich der Enzymaktivitätstests tätig und hat umfassende Erfahrung aufgebaut. Die fundierte Expertise und die qualifizierten Arbeitsabläufe gewährleisten die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit der Testergebnisse. Unser Assay-Service wurde aufgrund seiner Zuverlässigkeit vielfach ausdrücklich gelobt. Mit konstant hoher, professioneller Qualität stellt Creative Enzymes den Assay-Service nun auch für Oligosaccharid-Reducing-End-Xylanase zur Verfügung.

Glykosidhydrolasen (GHs) werden auf Basis der Aminosäuresequenz-Identität in mehr als hundert Familien klassifiziert. Die Oligosaccharid-Reducing-End-Xylanase gehört aufgrund ihrer Ähnlichkeit zu GH8-Endo-Xylanasen zur GH8-Familie. Oligosaccharid-Reducing-End-Xylanase (Rex, EC 3.2.1.156) ist eine einzigartige Exo-Oligoxylanase, die Xylo-Oligosaccharide an deren reduzierenden Enden hydrolysiert, dabei Xylose freisetzt und ein neues reduzierendes Ende in der Alpha-Konfiguration hinterlässt. Sie ist spezifisch für die Beta-Anomere von Xylooligosacchariden mit einem Polymerisationsgrad von mindestens 3. Bislang ist Rex das einzige vollständig exo-hydrolytische Enzym, das Monosaccharide vom reduzierenden Ende freisetzt.

Rex wurde ursprünglich aus dem Bakterium Bacillus isoliert; bislang wurde lediglich die Kristallstruktur aus Bacillus halodurans identifiziert. In diesem Organismus wird dem Enzym eine Schlüsselrolle im intrazellulären Xylan-Stoffwechsel zugeschrieben, indem es Xylooligosaccharide spaltet. Da Rex ein invertierendes Enzym ist, das am reduzierenden Ende das Alpha-Anomer erzeugt, ist für die nachfolgende Verarbeitung in vitro eine spontane Mutarotation des Substrats erforderlich. Unklar bleibt, ob es in vivo Faktoren gibt, die die Mutarotation von Xylooligosacchariden unterstützen, oder ob es biologische Gründe für einen derart ineffizienten Verarbeitungsmechanismus gibt. Daher konzentrieren sich die Studien auf grundlegende funktionelle Forschung. Hierbei unterstützt Creative Enzymes mit einem exzellenten Aktivitätsassay-Service. Die Quantifizierung der Enzymaktivität kann durch den Nachweis des Xylose-Anstiegs mittels Hochleistungs-Ionenaustauschchromatographie erfolgen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der reduzierendes-Ende-Xylose freisetzenden Exo-Oligoxylanase.
Referenz: Fushinobu, S. J.Biol.Chem. 2005 280: 17180-17186.

Creative Enzymes verfügt über eine ausgeprägte Expertise in der Enzymaktivitätsmessung und ist das einzige Unternehmen, das Assay-Services für Oligosaccharid-Reducing-End-Xylanase anbietet. Die Geräte in unserem Forschungszentrum entsprechen dem neuesten Stand der Technik und werden über Automatisierungssysteme betrieben, was auch bei großen Probenchargen die kürzestmögliche Bearbeitungszeit sicherstellt. Mit Creative Enzymes entscheiden Sie sich für einen erstklassigen Service.