Messung der Enzymaktivität der Mannose-1-Phosphat-Guanylyltransferase

Creative Enzymes bietet seinen Kunden die präziseste Aktivitätsbestimmung für Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase. Wir sind ein Team hochqualifizierter Wissenschaftler, das seit vielen Jahren an Enzymaktivitätsassays arbeitet. Der besondere Vorteil unserer spektrophotometrischen Analyse ermöglicht es uns, den Wettbewerb zu übertreffen und die Verlässlichkeit der Testergebnisse sicherzustellen.

GDP-Mannose (GDP-Man), eine aktivierte Form der Mannose, spielt eine Schlüsselrolle im biosynthetischen Signalweg zur Bildung N-verknüpfter Oligosaccharide zahlreicher Membran- und sekretorischer Glykoproteine eukaryotischer Zellen. Die Aktivierung von Mannose erfordert drei Enzyme: Phosphomannose-Isomerase (PMI), Phosphomannomutase und Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase (EC 2.7.7.13). Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase ist ein essenzielles Enzym für die Bildung mannosehaltiger Glycokonjugate, wie Protein-N- und -C-Glykane, Glykosylphosphatidylinositol-(GPI)-Proteinanker sowie bestimmte Glykolipid-Membrananker, und ist für mehrere wichtige biologische Funktionen bekannt. Dieses Enzym katalysiert die Synthese von GDP-Man aus Mannose-1-phosphat (Man-1-P) und GTP. Bitte beachten Sie, dass die meisten Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferasen für die Katalyse ein zweiwertiges Kation benötigen.

Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase ist ein Mitglied der Enzymfamilie der Nukleotidyltransferasen. Dieses Enzym wurde 1964 erstmals aus Athrobacter sp. partiell gereinigt und charakterisiert. Seitdem wurde es aus einer Vielzahl von Organismen und Geweben gereinigt, darunter Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium smegmatis, die Milchdrüse sowie Schweineleber. Interessanterweise ist die Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase aus P. aeruginosa ein bifunktionales Enzym, das sowohl Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase- als auch Phosphomannose-Isomerase-Aktivität aufweist.

Abbildung 1: Die durch Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase katalysierte Reaktion.
Referenz: Davis A J, et al. Journal of Biological Chemistry, 2004, 279(13): 12462-12468.

Wichtig ist, dass Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase als potenzielles Target für die Entwicklung antimikrobieller Arzneimittel dient. Darüber hinaus kann dieses Enzym auch als Zielstruktur für das Inhibitor-Design im Rahmen einer anti-leishmanialen Therapie genutzt werden. Daher ist der Nachweis der Aktivität der Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase von großer Bedeutung.

Creative Enzymes stützt sich auf ein exzellentes Expertenteam und widmet sich der Entwicklung robuster Aktivitätsanalytik; wir sind bestrebt, als weltweit anerkannter Marktführer im Bereich der Enzymaktivitätsassays zu agieren. Wir sind vollständig darauf vorbereitet, unseren Kunden die genauesten enzymatischen Assays zur Verfügung zu stellen. Die Enzymaktivität wird mittels eines kolorimetrischen Assays bestimmt, der mit anorganischer Pyrophosphatase gekoppelt ist. Das in der Reaktion gebildete anorganische Pyrophosphat wird anschließend durch die anorganische Pyrophosphatase zu anorganischem Phosphat umgesetzt. Der Anstieg der Konzentration an anorganischem Phosphat, der die Aktivität der Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase widerspiegelt, wird spektrophotometrisch durch Messung der Absorption bei 650 nm bestimmt. Unsere Testergebnisse gelten als die verlässlichsten und am Markt validierten und wurden in den vergangenen Jahren von Tausenden Kunden geschätzt. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihr vertrauenswürdiger Partner und freut sich jederzeit auf eine aufrichtige Zusammenarbeit mit Ihnen.

Abbildung 2: Die Kristallstruktur der Mannose-1-phosphat-Guanylyltransferase aus Thermotoga maritima.
PDB: 2X5S