Messung der Enzymaktivität für Thioglucosidase

Creative Enzymes ist stolz darauf, zu den wenigen international tätigen Unternehmen zu gehören, die Enzymaktivitätsassays gezielt entwickeln und durchführen. Unser Forschungszentrum zeichnet sich durch modernste Ausstattung, umfassende Erfahrung und ein exzellentes Expertenteam aus, die eine hohe Reproduzierbarkeit und Genauigkeit der Aktivitätsmessung gewährleisten. Wir sind vollständig darauf vorbereitet, präzise Enzymaktivitätsassays für Thioglucosidasen bereitzustellen.

Thioglucosidasen (auch als Myrosinasen oder Thioglucosid-Glucohydrolasen bezeichnet; EC 3.2.1.147, früher EC 3.2.3.1) sind eine Enzymgruppe, die die Hydrolyse von Glucosinolaten – sekundären Pflanzenmetaboliten – katalysiert und dabei D-Glucose sowie ein instabiles Aglykon-Zwischenprodukt bildet. Dieses Aglykon-Zwischenprodukt reagiert anschließend enzymatisch oder nicht-enzymatisch weiter und führt zur Bildung verschiedener Produkte. Abhängig vom lokalen Milieu können unterschiedliche Produkte entstehen, darunter Isothiocyanate, Thiocyanate, Epithionitrile und Nitrile. Diese Abbauprodukte können unterschiedliche biologische Effekte, einschließlich Toxizität, aufweisen. Es wurde gezeigt, dass sie als Abwehrsystem gegen Fraßfeinde (Insektenherbivoren) dienen, jedoch auch als Lockstoffe für spezialisierte Insekten wirken können, die die Pflanze zur Nahrungsaufnahme und Eiablage aufsuchen. Thioglucosidasen sind in der Pflanze räumlich von den Glucosinolaten getrennt gespeichert. Bei Gewebeschädigung, etwa durch Kauen oder Schädlingsbefall, kommen Thioglucosidasen mit Glucosinolaten in Kontakt, und es kommt zur Hydrolyse. Es ist zu beachten, dass das Myrosinase/Glucosinolat-System charakteristisch für alle Mitglieder der Familie Brassicaceae ist. Als kritischer Bestandteil des pflanzlichen Abwehrsystems liegt das Enzym in mehreren Formen vor. In Raps wurden etwa dreißig Isoformen von Thioglucosidasen vorhergesagt und anhand ihrer Sequenzhomologie in drei Unterfamilien (MA, MB und MC) klassifiziert.

Thioglucosidasen gehören zur Familie 1 der Glycosidhydrolase-(GH)-Superfamilie und sind die einzigen bekannten S-Glycosidasen. Die aktiven Zentren von Thioglucosidasen sind denen von O-Glycosidasen sehr ähnlich und arbeiten über einen Mechanismus mit Gesamtretention. Der gemeinsame Mechanismus und die einzigartige katalytische Aktivität wecken das Interesse vieler Forschender, die die aktivitätsbestimmenden Strukturen verstehen und Enzyme für andere spezifische katalytische Aktivitäten entwickeln möchten. Diese Studien fördern die starke Nachfrage nach einer effizienten und präzisen Überwachung der Thioglucosidase-Aktivität erheblich.

Creative Enzymes bietet die präziseste Quantifizierung der enzymatischen Aktivität von Thioglucosidasen. So kann die Enzymaktivität beispielsweise spektrophotometrisch unter Verwendung unseres hochreinen Substrats bestimmt werden, das nachweislich zur Genauigkeit des Aktivitätsassays beiträgt. Insgesamt verfolgt Creative Enzymes konsequent das Ziel höchster Kundenzufriedenheit durch kontinuierliche Verbesserungen der Servicequalität und der Kundenbetreuung.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Thioglucosidase aus Sinapis alba.
PDB: 1E4M